吸光光度法全解.pptVIP

2021/3/27 * 多元络合物 混配化合物 Nb-5-Br-PADAP-酒石酸 V-PAR-H2O 离子缔合物 AuCl4--罗丹明B 金属离子-配体-表面活性剂体系 Mo-水杨基荧光酮-CTMAB 2021/3/27 * 9.4.3 显色条件 1. 显色剂用量 适当过量 M + R = MR (被测组分) (显色剂) (有色配合物) R过量,反应完全, MR稳定,A值稳定。 c(R) A c(R) A c(R) A Mo(SCN)5 Fe(SCN)n 2021/3/27 * 2. 溶液的酸度 大多数显色剂是有机弱酸(碱),显色反应受酸度影响 M + R MR M(OH)n HR OH- H+ 绘制酸度曲线确定酸度,采取加入缓冲溶液的方法控制pH值 2021/3/27 * pH 1.8~2.5 Fe(Ssal)+ pH 4~8 Fe (Ssal)2- pH 8~11.5 Fe(Ssal)33- pH12 Fe(OH)3 黄色 棕褐色 紫红色 沉淀 PAR M-PAR 紫红色 磺基水杨酸与Fe3+ 2021/3/27 * 3. 显色时间 4. 显色温度 A t 5. 溶剂 有机溶剂会降低有色物的离解度,从而提高 显色反应的灵敏度。 2021/3/27 * 1. 测定波长选择 选择原则:“吸收最大,干扰最小” 灵敏度 选择性 9.5 光度测定条件及误差控制 9.5.1 测定条件选择 2021/3/27 * 1) 控制试样的量或溶液的稀释程度来控制溶液浓度。 2) 选择不同厚度的比色皿。 2. 控制吸光度范围 吸光度A 0.2 ～ 0.8 减小测量误差 2021/3/27 * 一定型号的分光光度计透光度读数误差是一常数 (? 0.2 %～ ? 2 %),但在不同的透光度读数范围内引起的浓度相对误差是不同的。 吸光度标尺刻度不均匀 A＝0.434 ,T＝36. 8% 时,测量的相对误差最小 A=0.2~0.8, T=15~65%,相对误差4% Er=dc/c×100％= dA/A=dT/TlnT 2021/3/27 * T 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 0 2 4 6 8 10 0.368 ?T= 0.01 2021/3/27 * 3. 参比溶液选择 原则:扣除非待测组分的吸收。 又称空白溶液,在测定时用来调节仪器A=0 (T = 100%),以消除溶液中其它物质的干扰,抵消比色皿对光的反射和吸收。 A (样) = A(待测吸光物质) + A(干扰) + A(池) A(参比) = A(干扰) + A(池) 2021/3/27 * 1) 溶剂空白 试液、试剂、显色剂均无色(无吸收),则可用溶剂如蒸馏水作参比。 2) 试剂空白 试液无色,显色剂或其它试剂有色(有吸收), 则用加显示剂和其它试剂的溶液作参比。 3) 试样空白 试剂、显色剂均无色(无吸收),试液中其它组分有色,则用不加显色剂的试液作参比。 2021/3/27 * C A 标准工作曲线图 正误差 负误差 9.5.2 吸光光度法的误差 对朗伯-比尔定律的偏移 非单色光引起的偏移 物理化学因素:非均匀介质及化学反应 吸光度测量的误差 2021/3/27 * 1. 非单色光引起的偏移 复合光由?1和?2组成,对于浓度不同的溶液a和b,引起的吸光度的偏差不一样,浓度大,复合光引起的误差大,故在高浓度时线性关系向下弯曲。 2021/3/27 * 2. 物理化学因素 化学反应 非均匀介质 胶体,悬浮、乳浊等对光产生散射,使实测吸光度增加,导致线性关系上弯 离解、缔合、异构等 如:Cr2O72-+H2O=2HCrO4-=2H++2CrO42- PAR的偶氮－醌腙式 2021/3/27 * 9.6.1 标准曲线法 理论基础:朗伯-比尔定律 相同条件下,测定不同浓度标准溶液的吸光度A A～c 作图 c A 标准工作曲线图 Ax cx 9.6 分光光度方法及应用 2021/3/27 * 9.6.2 示差吸光光度法 目的:提高光度分析的准确度和精密度 解决高(低)浓度组分(i.e. A在0.2~0.8以外)问题 分类:高吸光度示差法、低吸光度示差法、 精密示差吸光度法 特点: 以标准溶液作空白 原理: A相对 = ?A = ?bcx-