仪器分析：分子发光-T201704-S.pdfVIP

第五章 分子发光分析 Molecular luminescence analysis 胡 玉 斐 huyufei@mail.sysu.edu.cn Why ? 分子发光： 基态分子吸收一定的能量后，跃迁至激发态，当激发态分子 以辐射跃迁形式将其能量释放返回基态时,产生分子发光。依 据激发的模式不同，分为：  光致发光：分为荧光和磷光  热致发光： 热  白炽发光  场致发光：超声波 声纳发光  化学发光：化学反应能 一 荧光与磷光 荧光分析法历史：  16世纪，人们已经观察到当紫外和可见光照射到某些物质时， 这些物质就会发出不同强度的光，而当照射停止时，物质的发 光就随之很快消失  1852年，斯托克斯(Stokes)给出了上述现象的解释：分子荧光  1864年，斯托克斯提出荧光可用于分析  1867年，荧光成功地用于测定铝  20世纪，荧光分析仪器面世 荧光分析法的特点：  最大优点：灵敏度高，检出限通常比分光光度法低 2-4个数量级  选择性要优于分光光度法  能产生较强荧光的化合物相对较少，其应用不如分 光光度法广泛  许多重要的生物物质都具有荧光性质，该方法在药 物、临床、生命科学研究等领域具有重要意义 荧光及磷光的产生机理 荧(磷)光光谱 分子荧光与分子结构的关系 分子荧光(磷光)强度与荧光物质浓度的关系 荧光\磷光分光光度计 荧光分析法的应用及发展现状 1 荧光及磷光的产生机理 1. 1 分子能级与跃迁 第一、第二、…电子激发单重态S 、S … ； 1 2 第一、第二、…电子激发三重态 T1 、T2 … ； 洪特规则: 平行自旋比成对自旋稳定, 三重态能级比相应单重 态能级低； 大多数有机分子的基态处于单重态 S →T 禁阻跃迁通过其他途径进入 0 1 S →T 禁阻跃迁 能量重叠 1 1 S →T 禁阻跃迁 0 1 激发态单重态 S1 T 激发态三重态 1 S0 S0 S0 基态 S2 振动松驰, VR, 10-1210-14 s 紫 ( 同一多重态振动能级间) 外 内转换, IC, 10-1110-13 s (相同的多重态间) 可 S1 内系统窜跃, ISC, 10-210-6 s 见 (不同的多重态之间) 吸 10-15 s 10-8 s T1 收 -3 0 h 10 10 s A 荧 外转换, EC hA