医学机能实验技术实验教学课件9蛙心灌流.pptVIP

实验目的 学会离体蛙心灌流方法 观察K+、Na+、Ca2+三种离子、酸碱、温度、药物等因素对心脏活动的影响 通过对递质及受体竞争性阻断药对心脏活动的影响，初步了解受体的概念 实验器材和用品 器材： MedLab生物信号采集处理系统 张力换能器 铁支架 双凹夹 蛙心插管 蛙心夹 蛙类手术器械 吸管2支 大烧杯2只 温度计 恒温水浴 棉线 实验器材和用品 药品 　任氏液 0.65％ NaCl 2％CaCl2 1％KCl 3％乳酸 2.5％NaHCO3 1:10000去甲肾上腺素 1:1000普萘洛尔 1:100000乙酰胆碱 1:2000阿托品 5%洋地黄或0.1%毒毛旋花甙G等溶液 实验步骤和方法——动物模型制备 （1）破坏大脑和脊髓 （2）暴露心脏(蛙心各部组成示意图 ) （3）蛙心插管 （4）连接装置 蛙心各部组成示意图 蛙心插管 蛙心灌流仪器连接方法 注意事项 游离蛙心时，勿伤及静脉窦，连同静脉窦一起取下； 蛙心插管液面要保持恒定； 各观察项目效果明显后，再用任氏液冲管，待心跳正常后方可进行下一项目； 滴加药物后，要及时作标记； 本实验中，各药品要避免通过滴管互相污染。 心脏受自主神经的双重支配。交感神经兴奋时，去甲肾上腺素使心肌收缩力增强，传导增快，心率加快；而迷走神经兴奋时，乙酰胆碱使心肌收缩力减弱，心率减慢。 青蛙的心脏离体后，用理化特性近似于血浆成分的任氏液灌流，在一定时间内，可保持节律性收缩和舒张。改变灌流液的组成成分，心脏跳动的频率和幅度会随之发生改变。 分析与讨论 心肌的收缩活动是由钙离子触发的，由于心肌细胞的肌浆网不发达，故心肌收缩的强弱与心肌细胞内的钙离子浓度成正比。 　　　 ⑴ 0.65％NaCl灌流 　　　　　　　↓ 　　　　细胞外液Ca２＋ ↓↓ 　　　　　　　↓ 　心肌细胞动作电位期间Ca２＋ 内流↓↓ 　　　　　　　↓ 　　心肌细胞胞浆Ca２＋浓度↓↓ 　　　　　　　↓ 　　　　　心肌收缩力↓↓ 　　　　　 　　　 　　　　　⑶ 1％ＫCl灌流 　　　　　　　　↓ 　　　　　　细胞外液Ｋ＋↑ 　　　　　　 Ｋ＋与Ca２＋ 拮抗　　　Na＋通道失活 　平台期缩短　　　　　　　↓ 　　　↓ 　　　　　　心肌兴奋性丧失 　Ca２＋浓度↓↓ 　　　　　↓ 　　　↓ 　　　　　　心肌停跳于舒张期 　心肌收缩力↓↓ 　 　　　 　　　 　　　 思考题 １、实验过程中，为什么必须保持蛙心插管内液面高度的恒定？ ２、上述各种因素对心脏收缩活动有什么影响？为什么？ * * 体液因素对离体蛙心的影响 肇庆医学高等专科学校 陈妙茹 The effects of drugs on the animal heart in vitro 插入心室示意图 蛙心收缩幅度 蛙心收缩频率 观察指标 干预前 ①加入1～２滴0.65％NaCl溶液 ②加入1～2滴3％CaCl2 ③加入1～2滴1％KCl ④加入1～2滴1:10000 NA ⑤加入1～2滴1:100000乙酰胆碱 ⑥加入1～２滴 1:2000阿托品 ⑦加入5％洋地黄1-2滴 实验项目 实验步骤和方法---观察与记录 分析与讨论 　　　　　　　　⑵３％CaCl２灌流 　 　　　　　　　　　　　↓ 　　　　　　膜内－外Ca２＋浓度梯度↑↑　　　 慢反应细胞4期　　　　细胞动作电位期间Ca２＋内流↑↑ 自动除极速度↑　　　　　　 　　　　　　　　 　　　↓ 　　　　胞浆Ca２＋浓度↑↑ 　　　肌浆Ca２＋浓度 　　自律性↑ 　 　　　↓　　　　　　　　持续升高 　　　↓ 　　　　 Ca２＋与肌钙蛋　 　　　　↓ 　　 　　心率↑ 　　　　白结合数量↑↑　　　 Ca２＋与肌钙蛋　　　 　　　　　　　　　　　↓ 　　　　　白只结合不解离 　　　　　　　　　心肌收缩力↑↑ 　　　　　↓ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　心肌持续收缩 ⑷ 1：10000 去甲肾上腺素灌流 ↓ 兴奋心肌细胞膜上的β１受体 ↓ 心肌收缩力 ↑↑　　　　　 1：100000Ach灌流　　1：2000阿托品灌流 　　　↓　　　　　　　　　　　 ↓ 兴奋心肌细胞膜　　　　　阻断心肌细胞膜 　上的Ｍ受体　　　　　　　上的Ｍ受体 　　　↓　　　　　　　　　　　 ↓ 心肌收缩力 ↓ 　　　　　　心肌收缩力↑　　 　　　　　 ⑸ 　　　　⑹５％毒毛花甙Ｋ灌流 　　　　　　　↓ 　抑制心肌细胞膜上的Na＋ －Ｋ＋ ATP酶 　　　　　　　↓ 　　　　 Na＋ －Ｋ＋交换↓ 　　　　 Na＋ Ca２＋交换↑ 　　　　　　　　↓ 　　　　　心肌内Ca２＋ ↑ 　　　　 　　　↓ 　　　　　心肌收缩力