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细胞样品采集、冻存技术操作指南
科学家研发出LiveCyte新型细胞冻存技术,能有效地提高常规肿瘤细胞复苏后存活率与活力。技术质量稳定可靠,使用方便,助力科研工作者摆脱程序繁琐、操作复杂、容易污染的传统冻存方法,专注于后续实验研究。
LiveCyte即用型细胞冻存技术,所含化学成分明确,无动物源性成分,可一步实现细胞冻存并长期在-80℃冰箱保存,保护细胞免受冰 晶和溶质损伤,适用于大多数常规细胞。
技术优点
1、省去繁琐的降温步骤,可直接放置于-80°C 冰箱,节省时间和精力。
2、即用型,无需现配,操作方便,可减少实验中因操作引起的污染。
3、在多种哺乳细胞系中经过性能验证,其复苏率和活率达90%以上。
4、可长期存储于-80°C 冰箱(2年以上),取用方便。
具体操作步骤
1、培养皿或培养瓶中细胞按常规方法消化,或分离获得原代细胞后,收集于离心管中。
2、使用离心机离心,去除上清,收集细胞沉淀。
3、根据细胞生长密度加入适量的细胞冻存液进行重悬,充分混匀(推荐冻存密度为 1-2x10的6/ml)。
4、将细胞悬液分装至冻存管中,直接放置于-80°C 冰箱保存。24 小时后可移入液氮长期保存(可选)。
细胞复苏流程
1、从-80°C 冰箱或液氮罐中取出细胞。
2、迅速放入37°C 水浴,并不时摇动,在3分钟之内使其完全融化。
3、在冻存管中加入少量完全培养基,再将细胞混合液移入含有该细胞完全培养基的离心管中,样品和培养基比例为1:10,然后轻轻吹打,混合均匀。
4、离心后去除上清,收集细胞沉淀。
5、轻轻弹松细胞沉淀,加入适量培养液后接种于培养瓶或培养皿中,轻轻晃动使细胞分布均匀,置于37℃孵箱中培养。
特别说明
使用LiveCyte冻存液之前放在四度冰箱预冷,在常温条件下放置的时间不宜过长,以免影响冻存效率。
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