生物制药技术微生物次级代谢产物的生物合成与调节青霉素的生物合成与调节.pptxVIP

;任务一、微生物初级代谢产物的生物合成与调节;;分叉中间体;二、次级代谢的主要调控机制;1. 酶合成的诱导调节 在次级代谢途径中，某些酶也是诱导酶，在底物或底物的结构类似物的作用下诱导合成。 ; 例如，在头孢菌素c的生物合成中，蛋氨酸可诱导合成途径中的两种关键酶：异青霉素N合成酶(环化酶)和脱乙酰氧头孢菌素c合成酶(扩环酶)的合成。参与展开青霉的棒曲霉素合成的酶是被生物合成中的中间产物6-氨基水杨酸、龙胆酰醇、龙胆酰醛依次诱导合成的。;2．反馈调节 反馈调节在次级代谢产物的生物合成中起重要作用，包括次级代谢产物的自身反馈调节、分解代谢产物调节、前体的反馈调节以及初级代谢产物的反馈调节。;三、青霉素的生物合成与调节机制 ;①三肽的合成： 在ACV合成酶的催化下，将3个不同的氨基酸以酰胺键首尾相连形成ACV三肽(L-a-氨基己二酰-半胱氨酰-缬氨酸)。 ②β-内酰胺环的形成： 在异青霉素N合成酶（环化酶）的催化下，ACV三肽自身闭环形成异青霉素N（是合成各种青霉素的前体）。;③青霉素的形成： 异青霉素N在异青霉素N酰基水解酶的作用下，去掉L-a-氨基己二酸的侧链而形成6-氨基青霉素烷酸(6-APA)， 6-APA 是合成各种半合成青霉素的主要原料；在酰基转移酶的作用下，将细胞内游离的苯乙酸a-氨基己二酸进行交换，最后形成青霉素G(苄青霉素)。 ; 2．青霉素生物合成的调节机制; 发酵培养基中碳源物质的种类和浓度对青霉素的产量影响很大。葡萄糖是产黄青霉生长的良好碳源，但葡萄糖的分解代谢产物对青霉素的生物合成具有明显的阻遏作用。 ; 研究表明，当培养基中葡萄糖含量高于某一浓度时，与青霉素生物合成有关的酶(如ACV合成酶、异青霉素N合成酶)的合成被阻遏,抑制青霉素的合成。 葡萄糖有利于菌的生长，但抑制青霉素的合成，乳糖虽被利用缓慢，却是产生青霉素的良好碳源。 碳源的缓慢利用是大量合成青霉素的关键。 ;(2)氮源物质的调节作用 高浓度的铵根离子抑制产黄青霉的青霉素生物合成。 主要原因：高浓度的NH4+抑制了谷氨酰胺合成酶的活性，导致细胞内谷氨酰胺浓度很低，而谷氨酰胺是许??次级代谢产物的合成中的氨基供体。 如果降低培养基中游离NH4+浓度，产黄青霉发酵青霉素的产量可增加。 ;(3)赖氨酸的调节作用 1974年，Demain和Masurekar研究发现，在产黄青霉中赖氨酸生物合成途径的高柠檬酸酶对赖氨酸的抑制作用很敏感。由于赖氨酸积累而抑制高柠檬酸酶，导致a-氨基己二酸生物合成受到抑制，由此影响了青霉素的生物合成。;赖氨酸的调节作用;(4)末端产物的调节 研究表明，外源性高浓度青霉素完全抑制从头开始的青霉素生物合成。完全抑制所需的外源青霉素浓度因产生菌的生产能力的不同而异。;21