PBS缓冲液配制方法.docxVIP

PBS缓冲液配方 不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面 是我 们实验室的配方，供大家参考。 我们实验室的配方： A液：0. lmol/L磷酸二氢钾： 磷酸二氢钾(KH2P04, MW136. 09)1. 361g,加双蒸水至 100ml。 B液:0. lmol/L磷酸氢二钠： 酸酸氢二钠(Na2HP04. 2H20, MW177. 99)1. 78g,加双蒸水至 100ml。 或者酸酸氢二钠(Na2HP04. 12H20, MW358. 14) 3. 58g,加双蒸水至 100ml □ pH A 液(ml) B 液(ml) TOC \o 1-5 \h \z 60 9. 50 0. 25 91 9. 00 1. 00 24 ——8.00 ——2. 00 47 ——7.00 ——3.00 6. 64 6. 00 4. 00 6.81 ——5.00 ——5.00 98 ——4. 00 ——6. 00 17 ——3.00 ——7. 00 38 2. 00 8. 00 7. 73 1. 00 9. 00 04 ——0. 50 ——9. 50 一般免疫组化用 PBS都只包含Na2HP04?12H20 (磷酸氢二钠) NaH2P04?2H20 (磷酸二氢钠)Nacl 用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取 8g NaCl 0. 2g KCI、1. 44g Na2HP04 禾口 0. 24g KH2P04,溶于 800ml蒸惚水中，用HC1调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸惚水定 容至1L即可0. 01M PBS 缓 冲 液 称取 NaCI 8g, KCI 0. 2g, Na2HP04?12H203. 63g, KH2P04 0. 24g, 溶于 900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7. 4,加水定容至IL,常温 保存备用。 PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是我的总结： 母液的配制：0. 2M Na2HPO4 :称取 71. 6g Na2HPO4-12H2O,溶 于 1000ml 水 0. 2M NaH2P04 : 称 取 31. 2g NaH2P04-2H20, 溶 于 1000ml 水各种 浓度PB(pH=7. 4) 的配制： 先 配 0. 2M PB (pH=7. 4 100ml) 取 19ml 0. 2mol/L 的 NaH2P04 , 81ml 0. 2mol/L 的 Na2HP04,即 可 然后 只需将 0? 2M PB (pH=7. 4)按相应比例适当稀释 即可，如: 0. IM PB ( ph二7. 4) 500ml 0. 2M PB ,加水稀释至 1000ml 0. 01M PB ( PH=7. 4 ) 50ml 0. 2M PB ,加水稀释至 1000ml 0. 02M PB ( PH=7. 4) 可 100ml 0. 2 M PB,加水稀释至 1000ml 要NaCL的 加 入 NaCL 至 0? 9% ( g/100ml ) 即可。 另： 其它各种另 PH值的 pH 0. 2M NaH2P04 (ml ) 5.7 93.5 6.5 5.8 92 8 5.9 90 10 6.0 87.7 12.3 6. 1 85 15 6.2 81.5 18.5 6.3 77.5 22.5 6.4 73.5 26.5 6.5 68.5 31.5 6.6 62.5 37.5 0. 2M PB ( 100ml) 0. 2M Na2HP04 ( ml ) 6. 7 56. 5 43. 6.8 51 49 6.9 45 55 7.0 38 62 7. 1 33 67 7.2 28 72 7.3 23 77 7.4 19ml 81m 7.5 16 84 7.6 13 87 7. 7 10.5 0.5 7.8 8.5 91. 5 7.9 7 93 8.0 5. 3 94.7 5 磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB,磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓 冲液 配方 磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB) 试剂：NaH2P04 2H20 Na2HP04 12H20 配制方法:配制时，常先配制0. 2mol/L的NaH2P04和0?2mol/L的 Na2HP04,两者按一定比例混合即成 0. 2mol/L的磷酸盐缓冲液 (PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。 (1 ) 0. 2mol/L 的 Na2HP04;称取 Na2HP04. 12H20 31.2g(或 NaH2P04 H20 27. 6g)加重蒸水至 1000ml 溶解。 0. 2mol/L 的 Na2HP04:称取 NaHP04. 12H2O 71. 632g (或 Na2HP04 7H20