超详细蛋白质与酶工程重点知识点(完)---仅供参考2021.docx

名师归纳总结学习必备欢迎下载1、易错 PCR :通过调整反应条件来使PCR 扩增过程中复制错配率 增加，在目的基因中随机引入突变，继而获得蛋白质分子的随机突变体* 提高镁离子浓度或加入锰离子* 名师归纳总结 学习必备 欢迎下载 1、易错 PCR :通过调整反应条件来使 PCR 扩增过程中复制 错配率 增加，在目的基因中随机 引入突变，继而获得蛋白质分子的随机突变体 * 提高镁离子浓度或加入锰离子 * 降低体系中一种的 dNTP 浓度（至少 5-10%） * 运用低保真度 DNA 聚合酶 * 增加 DNA 聚合酶的浓度 属于无性进化：单一基因内进行遗传突变，费力、耗时，多用于小片段（ 800bp 以下） 2、 酶的概念： 酶是一类由活细胞产生的，对其特异底物（ 生大分子，包括蛋白质和核酸 substrate）具有高效催化作用的 精品学习资料 第 1 页，共 41 页 名师归纳总结学习必备欢迎下载+3、 辅酶辅基: 与酶蛋白结合疏松，可用透析或超滤的方法除去: 名师归纳总结 学习必备 欢迎下载 + 3、 辅酶 辅基 : 与酶蛋白结合疏松，可用透析或超滤的方法除去 : 与酶蛋白结合紧密，不能用透析或超滤的方法除去 (NAD) 。 (FAD、 FMN) 酶的活性中心 ：或称活性部位，指必需基团在空间结构上彼此靠近，组成具 有特定空间结构的区域，能与底物特异结合并将底物转化为产物。 精品学习资料 第 2 页，共 41 页 名师归纳总结学习必备欢迎下载4、抗体酶 或催化抗体：是具有催化功能的抗体。本质：免疫球蛋白，即具有催化作用的免疫球蛋白5、酶促反应特点 ：①②酶促反应具有极高的效率酶促反应具有高度的特异性：绝对特异性、 相对特异性、 立体结构特异性③酶促反应的可调节性：对酶量的调节，对酶活性的调节 名师归纳总结 学习必备 欢迎下载 4、抗体酶 或催化抗体 ：是具有催化功能的抗体。本质：免疫球蛋白，即具有催 化作用的免疫球蛋白 5、酶促反应特点 ： ① ② 酶促反应具有极高的效率 酶促反应具有高度的特异性： 绝对特异性、 相对特异性、 立体结构特异 性 ③ 酶促反应的可调节性：对酶量的调节，对酶活性的调节 6、诱导契合假说： 酶与底物相互接近时，其结构相互诱导、相互变形和相互适 应，进而相互结合。这一过程称为酶 -底物结合的诱导契合假说 。 7、底物浓度对反应速度的影响 ： ① ② ③ 级反应 当底物浓度较低时：反应速度与底物浓度成正比；反应为一级反应。 随着底物浓度的增加： 反应速度不再成正比例加速； 反应为混合级反应。 当底物浓度高达一定程度： 反应速度不再增加， 达最大速度； 反应为零 精品学习资料 第 3 页，共 41 页 名师归纳总结学习必备欢迎下载8、Km与 名师归纳总结 学习必备 欢迎下载 8、Km与Vmax的意义 精品学习资料 第 4 页，共 41 页 名师归纳总结学习必备欢迎下载精品学习资料第 5 页，共 41 页 名师归纳总结 学习必备 欢迎下载 精品学习资料 第 5 页，共 41 页 名师归纳总结学习必备欢迎下载9、 不可逆性抑制作用 ：抑制剂通常以共价键与酶活性中心或活性中心以外的必需基团相结合，使酶失活。可逆性抑制作用 ：抑制剂通常以非共价键与酶或酶 名师归纳总结 学习必备 欢迎下载 9、 不可逆性抑制作用 ：抑制剂通常以共价键与酶活性中心或活性中心以外 的必需基团相结合，使酶失活。 可逆性抑制作用 ：抑制剂通常以非共价键与酶或酶 - 底物复合物可逆性结 合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 抑制、非竞争性抑制、反竞争性抑制。 类型 ：竞争性 三种抑制剂的特点 精品学习资料 第 6 页，共 41 页 名师归纳总结学习必备欢迎下载精品学习资料第 7 页，共 41 页 名师归纳总结 学习必备 欢迎下载 精品学习资料 第 7 页，共 41 页 名师归纳总结学习必备欢迎下载精品学习资料第 8 页，共 41 页 名师归纳总结 学习必备 欢迎下载 精品学习资料 第 8 页，共 41 页 名师归纳总结学习必备欢迎下载10、酶的调节：酶活性的调节（快速调节）①②③酶原与酶原的激活变构（別构）酶 酶的共价修饰调节酶含量的调节（缓慢调节）①②酶蛋白合成的诱导和阻遏酶降解的调控11、酶原激活的意义避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化，并使酶在特定的部位和环境中发挥作用，保证体内代谢正常进行。 （消化管内的蛋白酶）有的酶原可以视为酶的储存形式。 名师归纳总结 学习必备 欢迎下载 10、酶的调节： 酶活性的调节（快速调节） ① ② ③ 酶原与酶原的激活 变构（別构）酶 酶的共价修饰调节 酶含量的调节（缓慢调节） ① ② 酶蛋白合成的诱导和阻遏 酶降解的调控 11、酶原激活的意义 避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化