糖痹胶囊对糖尿病大鼠坐骨神经超微结构的影响.docVIP

时间： TIME \@ yyyy年M月d日 2021年3月13日 学海无涯 页码：第 PAGE 1页共 NUMPAGES 1页 PAGE PAGE 1 糖痹胶囊对糖尿病大鼠坐骨神经超微结构的影响 糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy，DPN)是糖尿病最多见的并发症之一。据统计，60%~90% 以上的患者有不同程度的周围神经损害，与病程相关不明显[1]。很大一部分病人在糖尿病早期即可发生[2]。由于一旦出现DPN临床症状时多属晚期病变，故及时发现并有效地治疗DPN是一个急待解决的重要课题。西药对DPN治疗主要从阻止其发病机理方面进行，但均因作用不理想或副作用太大而不予肯定。近年VitB12的代谢物——甲基B12(又名甲钴胺，商品名“弥可保”)的临床应用取得了一定疗效。其治疗机制还不十分清楚，由于甲基B12是机体正常的代谢物，故不良反应较少，是目前治疗DPN的常用西药之一，但其作用也有一定的局限性。糖痹胶囊是我院在多年治疗糖尿病和DPN的临床实践基础上[3]，借鉴全国名老中医路志正治疗DPN的经验，针对DPN的中医病因病机及临床表现研制的复方制剂[4]。该方在临床治疗糖尿病取得了较好的疗效[5]。本研究观察了糖痹胶囊对糖尿病大鼠坐骨神经超微结构的影响，现报道如下。 　　1　材料与方法教师论文发表 　　11　动物　健康雄性SPF级SD大鼠30只，平均体质量(200±20)g，由广东省卫生厅实验动物中心提供，合格证号：0022505。在广州中医药大学SPF级实验室正常饲料喂养。 　　12　药品　糖痹胶囊主要药物组成：黄芪、桂枝、当归、白芍、丹参、怀牛膝、路路通、水蛭、地锦草等，由广东省中医院提供，每粒胶囊含生药05g，批号：粤药制字弥可保(甲钴胺片)由日本卫材株式会社生产，生产批号：国药准字分装批号：060421A。 　　13　试剂及仪器　链脲佐菌素(streptozotocin)为美国Sigma公司产品;JEM1200EX型透射电镜为日本电子株式会社产品;LEICAUCI型超薄切片机为莱卡公司产品。 　　14　动物模型制备[6]　取健康雄性SD大鼠30只，禁食12h后，将链脲佐菌素用01mmol/L柠檬酸缓冲液(pH 45)配成浓度为20mg/L，按50mg/kg一次性腹腔注射，72h后尾静脉取血，用血糖仪测定血糖 (取血前禁食8h)，凡血糖138mmol/L，且尿糖阳性者即进入实验(造模过程中死亡5只， 25只造模成功进入试验)。  　　15　分组及给药　将造模成功的糖尿病模型大鼠25只随机分5组，模型稳定后7d开始进行治疗，疗程共4周，实验期间不用任何药物控制血糖(1例因灌药不当导致大鼠死亡而剔除，共24只完成实验)：中药低剂量组灌服糖痹胶囊(剂量为05g·kg-1·d-1)，按动物系数折算，相当于60kg成人的10倍;中药高剂量组灌服糖痹胶囊(剂量为1g·kg-1·d-1)，按动物系数折算，相当于60kg成人的20倍;西药组灌服弥可保(剂量为250μg·kg-1·d-1)，按动物系数折算，相当于60kg成人的10倍;中西药组灌服糖痹胶囊和弥可保(剂量分别为05g·kg-1·d-1和250μg·kg-1·d-1);模型组给予等容积生理盐水每天灌胃1次;正常对照组给予相同饲料喂养，不予任何药物。 　　16　电镜观察　于治疗后4周末一次性腹腔注射10mg/L水合氯醛(300mg/kg)麻醉，俯卧位固定，取大鼠坐骨神经(坐骨切迹至远端1cm)，置于预冷的体积分数25%戊二醛中固定，10g/L四氧化锇进行后固定，Epon812环氧树脂埋剂与体积分数100%丙酮1∶100浸泡，修块定位后切片机切片，醋酸铀和硝酸铅双重染色，于透射电子显微镜下观察糖尿病大鼠坐骨神经超微结构。 　　2　结果教师论文发表 　　结果见图1。正常组大鼠坐骨神经有髓神经纤维的髓鞘致密，均匀、结构完整、排列规则且层次分明，髓鞘板层呈同心圆状排列;轴索完整且可见神经微丝、微管及线粒体;在由神经细胞支持和包绕的轴索内，线粒体嵴密集，神经丝丰富，神经膜结构正常，Schwann细胞及无髓神经纤维均正常，神经内微血管壁无增生(图1-a1、a2)。模型组大鼠坐骨神经有髓神经纤维的髓鞘板层完全分离，其间有水肿液和崩解的碎片，有的髓鞘出现斑块状脱髓鞘和节段性脱髓鞘;轴索萎缩，线粒体嵴消失，管泡 　　状成分增加，Schwann细胞变性坏死呈细胞碎片，无髓神经纤维和神经膜线粒