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土霉素片微生物检查方法的验证 土霉素片；微生物限度检查法 建立土霉素片的微生物限度检查方法。 方法：采用薄膜过滤法对土霉素片处理后，分别进行细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证。结果：金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的回收率均大于70%。结论：土霉素片采用薄膜过滤法检查微生物限度方法成立。 Terramycin pie ___ microorgani ___ inspection method confir ___tion Wang Yanning Guo Lingbo? 【Abstract】Objective:Establishment terramycin pie ___ microorgani ___ limit inspection method. Method: Uses the thin film to filter the law after terramycin pie ___ pro ___ssing, separately carries on the bacterium, the mold and the saharomy ___tes counts the method confir ___tion.Result：The golden yellow staphylocous and the white rosary fungus returns-ratio is bigger than 70%. Conclusion: The terramycin pie ___ uses the thin film to filter the law inspection microorgani ___ limit method to be tenable.? 【Key words】Terramycin pie ___; Microorgani ___ limit inspection method 土霉素是四环素类抗生素，能特异性地与细菌核糖体30S亚基的A位结合，抑制肽链的增长和影响细菌蛋白质的合成，对细菌有广谱抑菌作用。因此其微生物限度检查不能用平皿法，而应采用薄膜过滤法消除其抑菌作用后再检查。 1.1 仪器：HWS-250型恒温恒湿箱（天津苏瑞科技 ___有限公司），集菌仪（杭州泰林生物技术设备有限公司），薄膜（孔径0．22um），康氏振荡器。 1.2 试剂：玫瑰红钠琼脂培养基，营养琼脂培养基，胆盐乳糖增菌培养基，MUG培养基，甘露醇氯化钠琼脂培养基等，均由中国品生物制品检定所提供。 1.3 菌种：阳性对照菌：金黄色葡萄球菌（验证细菌）、白色念珠菌（验证酵母菌、霉菌）；阴性对照：金黄色葡萄球菌（验证大肠埃希菌）。所用菌种均由中国药品生物制品检定所提供；稀释剂及冲洗剂为pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液。 1.4 样品：土霉素片［0.25g（25万单位）］，厂家为河南华利药业有限责任公司，批号 2.1 细菌、霉菌、酵母菌检查方法验证。 2.1.1 细菌检测方法验证。 2.1.1.1 试验组：取供试品10g，加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液，于康氏振荡器上振摇10分钟，使片分散，500转、分离心后，分离上清液作为供试液。取上述供试液10ml，加入100ml稀释剂中，薄膜过滤，用冲洗液冲洗2次，每次100ml，第3次冲洗液中加入金黄色葡萄球菌菌悬液0.5ml，薄膜过滤，取出滤膜，面朝上贴于营养琼脂平皿上，35℃培养48小时，计数。 2.1.1.2 菌液组：取金黄色葡萄球菌菌悬液0.5ml,直接接种于营养琼脂平皿上，35℃培养48小时，计数。 2.1.1.3 供试品对照组：取上述供试液10ml,加入100ml稀释剂中，薄膜过滤，用冲洗液冲洗3次，每次100ml，取出滤膜，面朝上贴于营养琼脂平皿上，35℃培养48小时，计数。 2.1.1.4 稀释剂对照组：取稀释液10ml,薄膜过滤，用冲洗液冲洗2次，每次100ml,第3次冲洗液中加入0.5ml金黄色葡萄球菌菌悬液，薄膜过滤，取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂平皿上，35℃培养48小时，计数。 2.1.1.5 上述试验连续做三次，结果如下：? 金黄色葡萄球菌计数后平均值：? 稀释剂对照组菌数：第一次47个，第二次53个，第三次49个；? 菌液组菌数：第一次58个，第二次64个，第三次60个；? 试验组菌数：第一次45个，第二次54个，第三次46个；? 供试品对照组菌数：第一次0个，第二次0个，第三次0个。 2.1.1.6 计算金黄色葡萄球菌回收率。 2.1.1.6.1 稀释剂对照组的回收率:(稀释