微生物遗传育种基因重组与育种.pptxVIP

重组与突变的不同点： 突变是指一个细胞的同一个基因组中某一点或某一DNA片段发生的变异；而重组是来自两个细胞的不同基因组间遗传物质交换的结果，重组可在微生物细胞不发生突变的情况下形成新的基因型与表型。; 杂交（Hybridization）:是指不同基因型的亲本个体或细胞（指单细胞生物）交配而产生子代的过程。;第一节 细菌、放线菌的接合及育种;（一）接合现象的发现;对接合现象的解释：;（二）接合作用的证明;2、互养的排除;3、回复突变的排除;4、异核体和杂合二倍体的排除;（三）接合的机制;2、F因子的存在;3、F因子及F＋细胞的特性; F因子基因组有三个主要的基因丛，分别负责插入、复制和转移的功能。;B. 复制区（replication-region）：位于F因子结构图谱的40～49kb，包含一个特异的复制蛋白基因frp（F replication proteins）、决定不相容性基因inc（incompatibility）和一个复制起始点oriV（vegetative origin of replication）。; F因子的主要表现型是细胞表面有性菌毛，即F＋细胞表面都有性菌毛。F性菌毛分布在大肠杆菌的表面，数目与F因子相当，长度为1～20um。 性菌毛的功能：A. 是两性细胞接合时转移DNA的通道，又叫性纤毛桥（sex pili bridge）；B. 又是特异phage吸附的部位。;4、接合时DNA转移的机制;（四）F因子的三种存在形式;3、F′ ：携带有部分核染色体基因的F ′因子，含有F ′因子的菌株称为F ′菌株。;（五）三种“雄性”菌株与F－接合后的结果;2、Hfr ×F－ Hfr＋F－;3、F ′ ×F－ 2F ′;F ′菌的共同特征;F因子转导：通过F ′因子的转移而使受体菌改变 它的遗传性状的现象称为F因子转导或 或性因子转导或简称性导（F duction 或 sex duction）;（六）中断杂交实验;1957年，E.L.Wollman和F.Jocob设计了中断杂交实验。;中断杂交实验;中断杂交实验的结果： 基因是以ori、thr、leu、azi、ton、lac、gal的顺序连续转移的。在这个实验中，对Hfr菌的条件是，str基因在整个待测顺序的后端，如果strs基因率先进入受体，获得的重组体将在第一次选择性培养基上被str杀死。另外，thr、leu选择???标记应位于前端，如位于后端则无法测序。;二、放线菌的接合作用;（二）放线菌的性别;2、认为IF相当于E.coli的F＋、UF相当于E.coli的F－的理由;3、认为NF相当于Hfr的理由;（三）放线菌的致育因子;（四）天兰色链霉菌三种致育类型与大肠杆菌的三种致育类型之间的区别;三、采用接合技术育种;第二节 转化与育种;一、转化过程;（一）转化DNA的特点;2、DNA片段的大小与转化子数目的关系;3、单双链DNA与转化活性的关系;4、转化DNA的命运;（二）受体细胞的特点;（2）感受态的特点和影响因素 特点：感受态不是一种透性特征，而是在适当的生长条件下获得的一种生理特征;2、感受态的比例;4、感受态因子（CF）;二、转化过程的基因重组及育种; 如果a+和b+是连锁的，那么当DNA浓度下降时， a+ b+转化频率的下降与a+或b+的转化频率下降相同；相反，如果a+ 和b+并不连锁，那么a+ b+转化频率下降将远远超过a+ 或b+的转化频率。这是因为在DNA低浓度范围内，转化子的产生与DNA的浓度成正比。当a+ 、 b+两个基因位于同一DNA片段上是， a+ b+转化子与DNA浓度成正比的增加；当a+ b+基因分别位于不同的DNA片段上是，在一定的DNA浓度内， a+ b+转化子与DNA浓度的平方成正比。通过这样的实验检测转化基因的连锁情况可以方便的绘制出遗传图谱。;以trp+和tyr+ DNA作为供体;共转指数： 如将DNA加入到受体菌中，会产生、和三种转化子，将型转化子在其中所占的比例称为共转指数（cotransfer index）;（二）转化育种;第三节 转导与育种;二、转导现象的发现及证明;过滤性因子是噬菌体（phage）的证明：;三、普遍性转导（generalized transduction）;（一）完全普遍转导;（二）流产普遍转导;四、局限性转导（specialized tra