试验六水生感生态系统初级生产力的测定——叶绿素法.ppt

二、基本原理 6CO2 + 12H2O → C6H12O6 + 6H2O + 6O2 或化简式： CO2 + H2O 〔CH2O〕+ O2 由反应式可以看出氧气的生成量与有机质的生成量之间存在着一定的当量关系，所以可以通过测定瓶中溶解氧的变化，用O2量间接表示生产量，也可以将O2量转移成C量，从O2转移成C量转换系数是0.375。 三、仪器设备和试剂 冰箱； 离心机（配平）； 分光光度计； 采水器； 透明度盘----透明度 温度计---水温 抽滤器； 真空泵 乙酸纤维滤膜 （孔径0.80 μm& 0.45 μm 研钵； 离心管； 90%丙酮； 碳酸镁粉末； 石英砂； pH值------pH计或pH试纸 （见指导书2页） 溶氧量-----碘量法、溶氧量仪 （不测） 四、方法和步骤 （一）水体环境观测 透明度（透明度盘） 水温（温度计） pH值（pH计或pH试纸） 溶氧量（碘量法、溶氧量仪） （一）水体环境观测 （二）水样采集与保存 （三）抽滤 （四）提取 （五）光密度测定 （六）计算 四、方法和步骤 （一）水体环境观测 （二）水样采集与保存 （三）抽滤 （四）提取 （五）光密度测定 （六）计算 1.表层水:1m 2.采水器: 3.体积：1.5-2.0L 4.贮存： 避光， 低温（0～4 ℃） 每升水样中加 1%碳酸镁悬浊液1 mL 四、方法和步骤 （一）水体环境观测 （二）水样采集与保存 （三）抽滤 （四）提取 （五）光密度测定 （六）计算 1.滤膜： 先用0.80 μm，再用 0.45 μm 光面在下，粗糙面在上 2.水样：倒入定量体积（500 ml）的 水样进行抽滤， 3. 抽滤时负压应不大于50 kPa。 4. 水样抽完后，继续抽1～2 min 以 减少滤膜上的水分。 5.如不能立即提取，短期保存 （1～2 d）可放入普通冰箱冷冻室。 四、方法和步骤 （一）水体环境观测 （二）水样采集与保存 （三）抽滤 （四）提取 （五）光密度测定 （六）计算 滤膜剪碎----研钵中，+少量碳酸镁粉末+2～3 mL 90%丙酮-----充分研磨 匀浆物移入离心管中，用离心机（3000～4000 r·min-1）离心10 min 将上清液移入10 mL的容量瓶中 再用2～3 mL 90%丙酮，继续研磨提取，离心10 min，并将上清液转入容量瓶中。重复1～2次后， 用90%丙酮定容为10 mL，摇匀。 四、方法和步骤 （一）水体环境观测 （二）水样采集与保存 （三）抽滤 （四）提取 （五）光密度测定 （六）计算 用1 cm光程的比色皿， 分别读取750 nm、663 nm、645 nm、630 nm波长的吸光度， 并以90%丙酮作空白吸光度测定，对样品吸光度进行校正。 其中，750 nm的光密度用作校正样品的浑浊度（注：OD 750 nm不应超过0.005，超过表示样品浑浊，可用丙酮校正）， 而663 nm、645 nm、630 nm吸光度分别用以测定叶绿素a、叶绿素b、叶绿素c。 四、方法和步骤 （一）水体环境观测 （二）水样采集与保存 （三）抽滤 （四）提取 （五）光密度测定 （六）计算 1. 叶绿素a含量的计算 按如下公式计算（国家环境保护总局《水和废水监测分析方法》，2002）