科研人类疾病预防与控制.ppt

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第二节:人类疾病动物模型的分类;;;常用的自发突变模型;;;;二、按系统范围分类;;;;;;;;;;;;;;;;;;;三、中医证候动物模型;;四、设计动物模型的注意事项;;;;;;;;第三节:免疫缺陷动物模型 ;分类:;常见的免疫缺陷动物;;;;;;;;;转基因动物的概念;转基因动物技术的主要步骤;目的基因的制备;目的基因的导入;目前应用于生产转基因动物的方法 ;原核注射;;;转GFP绿色荧光胚胎;转GFP绿色荧光胚胎;生殖细胞载体技术;反转录病毒转染;;体细胞核移植;;核移植获得的表达红色荧光蛋白的兔克隆胚 ;核移植获得的表达绿色荧光蛋白的兔克隆胚 ;2007克隆出世界首例转基因克隆兔;2007获得世界首例转基因绿色荧光克隆兔;猪转绿色荧光蛋白的克隆胚胎体外发育;体细胞核移植方法生产转基因猪;胚胎干细胞技术; 嵌合体的制作通常由聚合法和显微注射法两种。聚合法首先去掉胚胎的透明带,然后将要聚合的细胞放在一个凹槽内进行培养,使它们发生融合。进而发育为一个胚胎,再通过胚胎移植得到嵌合体动物; 显微注射法是指将细胞或卵裂球注射到另一枚胚胎内(胚胎可以是不同阶段的,如2,4,8-细胞或囊胚),然后通过胚胎移植得到嵌合体动物。;囊胚注射 在直径为6cm的培养皿内用50μl ES细胞培养液做操作滴。选择形态较好的,细胞小而圆的吸到注射针内。注射针从内细胞团对面的位置刺入,将ES细胞轻轻的注入到囊胚腔内,一般每个囊胚注射12枚左右ES细胞。等囊胚腔消失的后,慢慢的抽出注射针。注射完一批后,一起移入CZB培养液中,放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。 ;; A :准备注射囊胚 B:ES形态 C: 准备注射 D: 注射过程 E: ES细胞完全进入囊胚中 F:注射后的囊胚 ; 出生的嵌合体小鼠

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