细胞凋亡与免疫.ppt

细胞凋亡与免疫;一、细胞凋亡概述 二、细胞凋亡的分子机制 三、细胞凋亡的胞内调控机制四、细胞凋亡与免疫生理 五、细胞凋亡与免疫病理;精品资料; 你怎么称呼老师？ 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你是否会认为老师的教学方法需要改进？ 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ 教师的教鞭 “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我笨，没有学问无颜见爹娘 ……” “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”;* 细胞凋亡(apoptosis):乃一种由基因控制的细胞自主性死亡方式。 ; ㈠ 细胞凋亡的形态学特点 ㈡ 细胞凋亡的生化改变 ㈢ 细胞凋亡的诱导剂和抑制剂 ㈣ 细胞凋亡常用检测方法;（一）细胞凋亡的形态学特点;;*;*;;细胞膜的变化;1．胞内Ca2+浓度增高 * 胞内Ca2+浓度增高?凋亡启动因素之一。 2．内源性核酸内切酶激活 Ca2+/Mg2+依赖性内源性核酸内切酶激活 →DNA核小体连接处被水解 →形成180～200bp（X）片段 3．生物大分子的合成 * 凋亡的发生依赖于新的RNA和蛋白质合成。 ;;(四)细胞凋亡常用检测方法 1．形态学方法 * 定性、定位；组织成分及细胞死亡类型复杂的情况下,难以判断结果。 2．电泳法 * 凋亡细胞基因组DNA电泳见“梯状”(ladder)条带； * 定性及定量；无法显示组织细胞形态结构,不能反映凋亡细胞与周围组织关系。;;凋亡的形态学检测;凋亡的形态学检测;电泳法检测凋亡—DNA Ladder;;DNA细胞周期分析;*;*;含量与凋亡关系;末端转移标记技术检测细胞凋亡;一、细胞凋亡概述 二、细胞凋亡的分子机制 三、细胞凋亡的胞内调控机制四、细胞凋亡与免疫生理 五、细胞凋亡与疾病;*;免疫相关的凋亡信号转导 (一)死亡受体途径 (二)线粒体-细胞色素C途径 (三)颗粒酶B途径 （四）死亡忽略途径 ;免疫相关的凋亡信号转导 (一)死亡受体途径 1．死亡受体(death receptor,DR) 2．Cas蛋白酶级联反应 3．不同死亡受体的信号转导途径;（1）成员 1）FasL/Fas（CD95/APO-1） 2）TNF-α/TNFRI 3）TRAIL（TNF-related apoptosis inducing ligand）/ DR4,DR5（DD contain receptor） 4）APO-3L/DR3;（2）共同的结构特点 1）??属TNFR家族成员； 2）胞外区N端含2-4个富含半胱氨酸的结构域 （cysteine rich domain,CRD）； 3）胞内区含1个由60-80个aa组成的死亡结构域（death domain,DD）,其可与胞浆死亡结构域蛋白（DD protein，DDP）中的DD同源结合，启动并传递凋亡信号。 * DDP：分子中含DD的凋亡信号蛋白。包括TRADD、FADD、RIP、CRADD、MADD等。;环1;;死亡结构域蛋白;2．Cas蛋白酶级联反应 Caspase概述 Cas级联反应（DR-转接蛋白途径） Cas活化的终末效应→细胞凋亡 ; (1) Caspase概述 * 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 （cystein protease with aspartic acid specificity,Caspase） 指半胱氨酸在酶的活性中心、而其底物分解作用位点都在天冬氨酸羧基端肽键、与ced-3同源的一类蛋白酶。 ; * ICE亚类（1、4、5、13、14）：参与促炎因子成熟等，在凋亡中起次要作用; 凋亡启动(起始）亚类（2、8、9、10）：参与启动凋亡效应Cas，以Cas8为代表。 【N端具有DED（death effect domain）】 * 凋亡效应亚类（3、6、7）：可剪切细胞结构蛋白，介导凋亡。;;Caspase家族;Caspase家族蛋白酶的识别序列及作用底物;Caspase家族成员的同源分析;DRL+DR →DR的DD聚集 →FADD募集（Fas associated protein with DD) →通过FADD N端的DED（death effect domain）与pro-Cas-8的N端（ DED ）结合 →pro-Cas-8自身水解 →Cas-8 →依此水解其他pro-Cas →Cas-3活化→细胞凋亡 ;;细胞骨架蛋白（肌动蛋白、肌球蛋白等）结构改变 →细胞凋亡的形态学改变 裂解层粘蛋白