正定型血型检测卡标准操作程序.docxVIP

作业指导书 文件编号：LXYY-3-LJ-01 ABO、RhD正定型血型检测卡标准操作程序 版号/修号： 2/ 0 页 码：第 PAGE 1页，共 NUMPAGES 3页 编写者：陈观英 审核者：陈剑锋 批准者：鲍帮秀 编写日期：2016.05.01 审核日期：2016.05.25 批准日期：2016.06.01 2016.06.01发布 PAGE 1/ NUMPAGES 3 2016.06.01实施 ABO、RhD正定型血型检测卡标准操作程序 检验原理 利用微柱凝胶过筛检测原理。待检红细胞(RBC)如果与凝胶中的单克隆IgM抗A、抗B、抗D试剂发生特异性凝集反应，在一定的离心力作用下，凝集的红细胞被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中，判为阳性结果，表示待检红细胞含有相应的血型抗原；RBC全部沉积于凝胶孔腔底部，判为阴性结果，表示待测待检红细胞不含相应的抗原。供医院临床对ABO血型系统的A、B抗原，Rh血型系统的D抗原的检测。 二、检测卡主要组成成份 A、B、O、Control微柱管分别各含凝胶65%，A管含35%单克隆IgM抗A（效价）≥128）、B管含35%单克隆IgM抗B（效价≥128）、D管含35%单克隆IgM抗D（效价≥64）、Control管含35%生理盐水。检测卡储存条件2～25℃，有效期为一年。 三、适用仪器 专用离心机：TD-2Y医学检验多功能离心机或达到TD-2Y离心参数的自动化仪器。 准备工作 1.微柱凝胶试剂卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气 泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心，2000rpm 10分钟。 2. 检测标本的准备： 红细胞悬液的制备：取被检者压积红细胞10微升，加入1毫升红细胞稀释液（95%生理盐水)。配置好的红细胞悬液外观应为均匀淡红色，无絮状物和血块。 五、操作步骤 1.将准备好的ABO.RhD血型定型试剂卡做好标记 将待检者0.8%－1%红细胞悬液分别加入第1至第4管中，每管50ul 即刻使用专用离心机离心，1000rpm2分钟，1800rpm3分钟，取出肉眼判定结果。 结果判定标准按下表： 阳性 4+ 表示RBC绝大部分凝聚于凝胶表层。 3+ 表示RBC多数凝聚于凝胶表层，少数RBC凝集颗粒悬浮于近胶表层。 2+ 表示部分RBC沉积于胶底，部分RBC凝集颗粒悬浮于凝胶中。 1+ 表示RBC多数沉积于胶底，可见少数RBC凝集颗粒悬浮于凝胶中。 ± 表示RBC绝大多数沉积于胶底，极少数RBC凝集颗粒悬浮于近胶底。 dcp 表示混合凝集外观，部分RBC凝集颗粒集结于凝胶表层，部分RBC沉于胶底。 PH 表示部分溶血，凝胶管中液体呈清澈透明红色，凝胶中有残留RBC。 H 表示完全溶血，凝胶管中液体呈清澈透明红色，凝胶中无RBC。 阴性 － 表示RBC全部沉积于胶底。 血型正定型结果判定见表： 血型 抗A 抗B 抗D 质控 D阳性 A ＋ － ＋ － B － ＋ ＋ － O － － ＋ － AB ＋ ＋ ＋ － D阴性 A ＋ － － － B － ＋ － － O － － － － AB ＋ ＋ － － 六、 注意事项 检测标本必须为抗凝血。 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。 如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。 若结果为±或1＋需进一步分析，可能为亚型或弱化抗原。 红细胞悬液的浓度控制在0.8％--1%之间，否则可能出现漏检或混合凝集。 每日实验前，先取出微柱凝胶卡放置一段时间至室温，以防冷凝集。 试剂卡应放在18-25℃储存，如若长期放在4℃冰箱，建议每1-2个月取出，用专用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。 七、参考文献： 试剂说明书 《输血技术学》 3、《临床检验操作规范》第四版