高中生物课件-2.1lly三类物质的鉴定1005.pptVIP

实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应 需鉴定的物质 还原糖 淀粉 脂肪 蛋白质 试剂 斐林 试剂 碘液 苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液 双缩脲试剂 实验一、检测还原糖 1）实验原理： 还原糖与斐林试剂在50℃~65℃水浴加热下作用，生成砖红色沉淀 还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖 生物体中的还原糖主要有哪些呢? 2）配制斐林试剂： ①提前配制斐林试剂的甲液（0.1g/ml的NaOH溶液）和乙液（0.05g/ml的CuSO4溶液） ②使用时将甲液和乙液等量混匀配得斐林试剂，并立即使用 使用要点： 甲液和乙液等量混匀， 现配现用 1.向试管中注入2ml组织样液 2.向试管中注入1ml斐林试剂（甲乙液等量混匀） 3.将试管放入50~65℃水浴加热约2min 4.观察试管中颜色变化 3）检测方法和步骤 4）还原糖的检测结果： 棕色 砖红色沉淀 反应实质： Cu(OH)2溶液与还原性糖反应，生成砖红色沉淀Cu2O 蓝色 还原糖的检测结果 选材： 注意事项： 显色反应 (等量混匀) 50～65.C水浴 加热2min 刚配置的斐林试剂1ml 含糖量较高的白色或近于白色的植物组织 排除材料本身的颜色色素对实验结果的干扰 易出现明显的实验现象 操作方面：还原糖检测时，使用水浴加热，试管 底部不要触及烧杯底部，以防受热不均匀。 试管口不能朝向实验者，以免造成烫伤。 问题探讨: 1、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ Cu(OH)2溶液不稳定，时间太长，易沉淀，无法参与反应。 深化 2、斐林试剂为何要先等量混匀再加入样液，而不是分开加入？ 反应的本质是Cu(OH)2溶液与还原性糖反应,先等量混匀的目的是要配成Cu(OH)2溶液 3、可以用甘蔗或西瓜汁做还原糖的鉴定吗？ 不可以，因为蔗糖不属于还原糖，而西瓜汁又是红颜色 实验二、蛋白质的鉴定 1）实验原理： 蛋白质与双缩脲试剂作用发生紫色反应 2）双缩脲试剂： ①提前配制双缩脲试剂的A液（0.1g/ml的NaOH溶液）和B液（0.01g/ml的CuSO4溶液） ②使用时先加2mlA液造成碱性环境，再加入4滴B液。 使用要点： 先加A液，再加B液 B液不能加入过多 ?向试管内注入2ml待测组织样液 ②向试管内注入双缩脲试剂A液1ml，摇匀 ?向试管内注入双缩脲试剂B液4滴，摇匀 ?观察颜色变化 3）检测方法和步骤 蛋白质的鉴定 选材与制备 组织样液： 黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液） 显色反应 现象： 紫色反应 (创设碱性条件) (提供Cu2+) A液1ml B液4滴 实质是CuSO4在碱性条件下与蛋白质反应形成紫色物质 避免试验后粘在试管壁上，不易清洗 蛋白质的检测结果 问题探讨: 1、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能 过量？ 过量的双缩脲试剂B液会与A液反应，生成Cu(OH)2使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。 2、为什么要先加A液，再加B液？ 反应的实质是CuSO4在碱性条件下与蛋白质反应，先加A液的目的是创设反应所需的碱性条件 深化 实验三、脂肪的鉴定 1）实验原理： 脂肪可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或被苏丹Ⅳ染液染成红色 2）不同方法 方法一、 方法二、 制作花生子叶临时切片，显微镜观察子叶着色情况 直接向组织样液中加入3滴苏丹Ⅲ染液 3）脂肪的鉴定的实验步骤 取材： 制片： ①选取最薄的薄片移至载玻片中央 ②在薄片上滴加苏丹Ⅲ染液2 ~ 3滴，染色３min ③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色 ④吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片 显微观察： 先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察 现象： 有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒 切片： 花生子叶横断面上切下若干薄片，放于盛清水的培养皿中 花生种子（浸泡３－４h），去皮， (或苏丹Ⅳ染液染色1min) (即洗去多余的苏丹Ⅲ 或苏丹Ⅳ染液) 脂肪的检测结果 脂肪微粒 1、花生子叶切片要足够薄，若太厚，脂肪颗粒观察 不清楚 2、若用花生种子做实验材料，必须提前浸泡3-4h，浸泡时间短，不容易切片；时间过长，则组织太软，切下的薄片不宜成形。 3、染色时间不宜过长，因染液中有酒精，脂肪可以溶解在酒精中，染色时间过长会使橘黄色消失。 碘液2滴 摇匀后变成蓝色 实验四：淀粉的鉴定 ①向试管内注入2ml待测组织样液 ②向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化