Tan第五章目的基因的导入和重组子的筛选.pptxVIP

本课程内容;第五章 目的基因导入和重组子的筛选;5.1 DNA片段的连接重组;DNA分子连接;5.1.1 DNA重组（连接）的类型;5.1.2 DNA片段之间连接的方式;5.1.3 DNA重组中需注意的问题;5.2 受体细胞及其选择的基本原则;5.2.1 受体细胞;5.2.2 受体细胞选择的原则;5.3 基因转移（gene transfer）;;5.3 基因转移（gene transfer）;5.3.1 重组质粒DNA分子转化大肠杆菌;5.3.1.1 细菌转化的机制;;;5.3.1.2 化学转化法（CaCl2诱导大肠杆菌转化法）;5.3.1.2 化学转化法（CaCl2诱导大肠杆菌转化法）;5.3.1.3 电激法（电穿孔转化法）;5.3.1.4 转化率的计算及???影响因素;影响转化效率的因素;5.3.2 重组?噬菌体DNA分子转导大肠杆菌;;噬菌体转化大肠杆菌的方法;噬菌体转化大肠杆菌的方法;λ噬菌体的体外装配;λ噬菌体体外装配的两种系统;噬菌斑;重组噬菌体的鉴定;;利用lacZ基因的插入失活筛选重组噬菌斑 ;5.3.3 重组DNA分子转入真核细胞;5.4 重组子筛选的方法;5.4.1 遗传表型直接检测法;;抗药性选择标记插入失活/插入表达筛选法;根据载体的选择标记的初步筛选;;利用tetR的插入失活筛选重组克隆;抗药性选择标记插入表达筛选法;?-半乳糖苷酶显色反应筛选法（