第五章 第五节鱼类学.pdf

第五节 多倍体鱼类的鉴定 1. 形态学分析方法 2. 核体积测量法 3. 染色体计数法 4. 流式细胞计数法 1. 形态学分析方法  同源多倍体鱼与二倍体鱼在形态上没有明显差别。  比如，Bonar等 （1988）用形态学方法分析草鱼的38个 数量性状，发现，在2n和3n之间，有8个性状存在着显 著差异，但没有一个性状可以百分之百准确地将二倍 体和三倍体区分开来。  而异源多倍体鱼由于双亲基因剂量 的差别，多倍体杂种可以比较容易 地与二倍体亲本区别开来。 2. 红细胞核测量法  细胞核大小与染色体数目呈正比例增加；  为维持恒定的核质比例，细胞的大小也按比例增加；  鱼类红细胞及红细胞核是椭圆形的 核面积= a ×b ×π/4 核体积= a2 ×b/1.91 红细胞核： V /V = 1.5 3n 2n S /S = 1.3 3n 2n Diploid Tetraploid Hexaploid 3. 染色体计数法 染色体计数法是鱼类倍性鉴定最准确、最直 接也是最经典的方法。 最适材料：头肾 最佳方法：PHA-活体短期培养法 缺点：染色体标本的制备比较费时，并且需要 牺牲实验鱼。 解决办法：采用再生鳍或培养的血淋巴细胞来 制作染色体标本，可避免杀死实验鱼。 4. 流式细胞计数法 原理：鱼类的红细胞有细胞核，细胞核内的DNA与染色体数目是 成比例的。当染色体倍数增加时，其DNA含量也相应增加。因此，可 以通过测定细胞核内的DNA含量来准确地确定其染色体倍性。 方法：将红细胞用荧光染料染色，细胞内的DNA物质被荧光染 料染色。通过激光照射，激光激活荧光分子使它们发出特定颜色的 荧光。发出的荧光越多，表明细胞内DNA含量越多。 特点：非常简便，高效