大肠杆菌测定(精).docxVIP

水中总大肠杆菌的测定 根源 :加入时间 :2010-3-30 12:15:51 原理 总大肠杆菌群可用多管发酵法或滤膜法检测。多管发酵法的原理是根据大肠菌 群细菌能发酵乳糖 ,产 酸产气以及具备革兰氏染色阴性 ,无芽孢 ,呈杆状等相关特性 , 通过三个步骤进行查验 ,求得水样中的总 大肠菌群数 ,实验结果以最可能数 (most probable number,简称 MPN 表示。 仪器 2.1 高压蒸汽灭菌器。 2.2 恒温培养箱 ,冰箱。 2.3 生物显微镜 ,载玻片。 2.4 酒精灯 ,镍铬丝接种棒。 2.5 培养皿 (直径 100mm ,试管 (5 ×150mm,小倒管 ,吸管 (1, 5, 10ml ,烧杯 (200, 500, 2000ml , 锥形瓶 (500, 1000ml ,采样瓶。 培养基及染色剂的制备 3.1 乳糖蛋白胨培养液 : 将 10g 蛋白胨、 3g 牛肉浸膏、 3g 乳糖和 5g 氯化钠加热溶于 1000mL 蒸馏水中 ,调节 pH 为 7.2-7.4, 再加入 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1mL ,充足混匀 ,分装于试管 (内有倒管中 ,于 121℃高压灭菌器中灭菌 15min ,贮存于冷暗处备用。 3.2 三倍浓缩蛋白胨溶液 : 按上述乳糖蛋白胨培养液的制备方法制备。除蒸馏水外 ,各组分用量增加至三 倍。 3.3 品红亚硫酸钠培养基 贮备培养基的