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第 二 章核酸的结构和功能;核 酸(nucleic acid) ;一、核酸的发现和研究工作进展 ;二、核酸的分类及分布 ;第一节
核酸的化学组成及其一级结构The Chemical Component and Primary Structure of Nucleic Acid;核酸的化学组成 ;嘌呤(purine) ;;戊 糖;核苷:AR, GR, UR, CR
脱氧核苷:dAR, dGR, dTR, dCR;核苷酸:
AMP, GMP, UMP, CMP
脱氧核苷酸:
dAMP, dGMP, dTMP, dCMP ;体内重要的游离核苷酸及其衍生物;5′端;二、核酸的一级结构;;第二节
DNA的空间结构与功能Dimensional Structure and Function of DNA;DNA的二级结构-双螺旋结构
DNA双螺旋结构的研究背景和历史意义
DNA双螺旋结构模型要点
DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装
DNA的超螺旋结构
原核生物DNA的高级结构
DNA在真核生物细胞核内的组装
DNA的功能;一、 DNA的二级结构
——双螺旋结构;(一)DNA双螺旋结构的研究背景;(二) DNA双螺旋结构模型要点
(Watson, Crick, 1953);(二) DNA双螺旋结构模型要点
(Watson, Crick, 1953);碱基互补配对 ;(二) DNA双螺旋结构模型要点
(Watson, Crick, 1953);(三)DNA双螺旋结构的多样性;二、DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装;意义
DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。 ;(二)原核生物DNA的高级结构;(三)DNA在真核生物细胞核内的组装;三、DNA的功能;第三节 RNA的结构与功能;RNA的种类、分布、功能;一 、信使RNA的结构与功能;* mRNA结构特点;帽子结构;mRNA核内向胞质的转位
mRNA的稳定性维系
翻译起始的调控 ;* mRNA的功能
把DNA所携带的遗传信息,按碱基互补配对原则,抄录并传送至核糖体,用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。;* tRNA的一级结构特点
含 10~20% 稀有碱基,如 DHU
3′末端为 — CCA-OH
5′末端大多数为G
具有 T?C ;N,N二甲基鸟嘌呤;* tRNA的二级结构
——三叶草形
氨基酸臂
DHU环
反密码环
额外环
TΨC环;;* rRNA的结构;* rRNA的种类(根据沉降系数);核蛋白体的组成;四 、其他小分子RNA及RNA组学;snmRNAs的种类
核内小RNA
核仁小RNA
胞质小RNA
催化性小RNA
小片段干涉 RNA ;RNA组学研究细胞中snmRNAs的种类、结构和功能。同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下snmRNAs的表达具有时间和空间特异性。 ;核 酸 的 理 化 性 质
The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid;1. DNA或RNA的定量
OD260=1.0相当于
50μg/ml双链DNA
40μg/ml单链DNA(或RNA)
20μg/ml寡核苷酸
2.判断核酸样品的纯度
DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8
RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0;二、DNA的变性(denaturation);;例:变性引起紫外吸收值的改变;热变性; Tm:变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度,又称融解温度(melting temperature, Tm)。其大小与G+C含量成正比。;三、DNA的复性与分子杂交
;在DNA变性后的复性过程中,如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件(温度及离子强度)下,就可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。
这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成,也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。;DNA-DNA
杂交双链分子;核酸分子杂交的应用
研究DNA分子中某一种基因的位置
定两种核酸分子间的序列相似性
检测某些专一序列在待检样品中存在与否
是基因芯片技术的基础 ;第 五 节 核 酸 酶 Nuclease;核酸酶是指所有可以水解核酸的酶
依据底物不同分类
DNA酶(deoxyribonuclease, DNase):
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