《药理学》实验5地塞米松对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响.ppt

了解建立小鼠耳廓肿胀急性炎症模型的方法； 了解糖皮质激素类药物抗炎症性渗出的作用。 实验动物：昆明种小白鼠，体重18~22g，雌雄各半。 试剂：生理盐水，0.5%地塞米松磷酸钠注射液（即5mg/mL），二甲苯。 其他材料：打孔器，精密电子天平。 注：给药之前，用生理盐水将0.5%地塞米松磷酸钠注射液稀释至0.1%。 小鼠耳廓肿胀模型是一种非特异性急性炎症模型，是以化学物质作为致炎剂来诱导小鼠耳廓肿胀。目前，常用它来评价一些合成化合物和植物有效成分的抗炎活性。 常用的致炎剂：二甲苯，巴豆油，花生四烯酸，佛波酯等。 二甲苯的主要致炎机制：能引起局部炎症物质，如组胺、缓激肽的释放，导致局部血管扩张，毛细管通透性增强，炎症细胞浸润局部组织，最终造成耳部急性渗出性炎症。二甲苯作为致炎剂的优缺点： 成本低、造模简单； 耳廓肿胀的个体差异较大； 耳廓肿胀持续时间较短（一般二甲苯涂抹30~60min耳廓达到最大肿胀，90min后恢复），不合适于那些抗炎作用发挥缓慢的化合物。 地塞米松是一种糖皮质激素类药物，具有抗炎作用强，作用时间长的特点。 正常生理剂量的糖皮质激素：是维持机体正常代谢所必需； 超生理剂量：具有抗炎、抗毒、抗休克和抗免疫等药理作用。 本实验是先给予地塞米松，当药物在体内达到一定的血药浓度后，用化学致炎剂二甲苯浸润造成小鼠单只耳廓急性炎性水肿，模型建立后用打孔器取两耳同一部位的耳片，以耳片的重量差为评价指标，判断药物对炎症的抑制率。 1、给予抗炎药物 小鼠均衡随机分组，雌、雄各分为2组，每组8只，标记。 奇数组为空白对照组，偶数组为给药组。 空白对照组：腹腔注射生理盐水0.1mL/10g； 给药组：腹腔注射o.1%地塞米松磷酸钠注射液0.1mL/10g 2、给药30min后，建立小鼠耳廓肿胀急性炎症模型（在通风的地方进行） 一位同学固定住小鼠； 另一位同学用移液枪吸取10微升二甲苯，边滴边均匀涂抹在小鼠右耳的内表面； 同样方法，二甲苯涂抹在右耳的外表面。 注意：二甲苯的量要准确，要涂抹完全。 3、比较小鼠两只耳朵的红肿情况。 4、涂抹二甲苯40min后，颈椎脱臼处死小鼠，用剪刀剪下两只耳廓，在精密电子天平上称耳廓的重量。 5、在两只耳廓相同的部位剪下8mm的圆形耳片。 6、在精密电子天平上称耳片的重量，计算肿胀度和肿胀率。 肿胀度（mg）=右耳耳片重量-左耳耳片重量 肿胀率（%）=肿胀度/左耳的重量 地塞米松对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响（x ±s，n=8） 组别 n 给药剂量（mg/kg） 左耳重（mg） 右耳重（mg） 肿胀度（mg） 肿胀率（%） 空白对照组 8 — 给药组 8 10 比较两组是否有显著性差异。 描述两组小鼠的耳廓在外观上的差异。 炎症分为感染性炎症和非感染性炎症，前者是由微生物病原体引起的；后者包括非特异性炎症和变态反应性炎症。 不同的致炎剂，造模方法、作用机理和应用特点不同。 * 该模型可用打孔器取双侧耳部同一部位的耳片，称重后计算两耳片的重量差作为检测指标； 也可通过测厚仪测量小鼠耳肿胀前后的耳厚度，从而计算出药物对炎症的抑制率。 * 糖皮质激素类药物按其生物效应期分为短效、中效和长效激素。地塞米松为长效的糖皮质激素。糖皮质激素对各种化学、机械、病原体、变态反应等引起的炎症有抑制作用。在炎症的早期有减轻渗出、水肿、毛细血管扩张、白细胞浸润和吞噬反应，从而改善红、肿、热、痛等症状；在炎症后期，又能一只毛细血管新生和成纤维细胞的增生，并抑制肉芽组织形成，防止粘连和疤痕形成。 但糖皮质激素在抗炎的同时，有免疫抑制作用，不能长期使用。在严重急性感染时，糖皮质激素作为辅助治疗，通过其抗炎、抗毒和免疫抑制等作用可迅速缓解症状。 糖皮质激素抗炎作用机制，是通过抑制炎症过程的某些环节，如与影响细胞因子、炎症介质及一氧化氮合成酶等作用有关。 * 炎症分为感染性炎症和非感染性炎症，前者是由微生物病原体引起的；后者包括非特异性炎症和变态反应性炎症。 不同的致炎剂，造模方法、作用机理和应用特点不同。 * 该模型可用打孔器取双侧耳部同一部位的耳片，称重后计算两耳片的重量差作为检测指标； 也可通过测厚仪测量小鼠耳肿胀前后的耳厚度，从而计算出药物对炎症的抑制率。 * 糖皮质激素类药物按其生物效应期分为短效、中效和长效激素。地塞米松为长效的糖皮质激素。糖皮质激素对各种化学、机械、病原体、变态反应等引起的炎症有抑制作用。在炎症的早期有减轻渗出、水肿、毛细血管扩张、白细胞浸润和吞噬反应，从而改善红、肿、热、痛等症状；在炎症后期，又能一只毛细血管新生和成纤维细胞的增生，并抑制肉芽组织形成，防止粘连和疤痕形成。 但糖皮质激素在抗炎的同时，有免疫抑制作用，不能长