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第三章 毒素快速检测方法;第一节 自然产生的毒素;贝类毒素的分类;麻痹性毒素(PSP);麻痹性毒素中毒症状;误食会产生以腹泻为主要特征的中毒效应。
腹泻性贝毒常见于淡菜、牡蛎、日月贝等贝类。;贝类毒素简介;神经性贝类毒素;病原藻:为菱形藻科中的拟菱形藻属和菱形藻中硅藻的某些种,毒素以软骨藻酸(DA)为主。;中毒症状:恶心、呕吐、腹痛、腹泻等;神经系统症状则约48小时内出现,主要症状为记忆丧失、心律不齐、半身麻痹等;严重者则会产生痉挛及昏迷;老年且出现严重神经症状患者易导致死亡,死亡率约2%。;一.河豚毒素的分布
1.河豚鱼全球200多种,我国70多种,广泛分布于热带、亚热带海区
2.外形:;河豚鱼;(2)河豚毒素含量依季节而变:
春夏季:毒性最强
冬季:卵巢、鱼卵中毒素浓度最高
(此时味最美);河豚毒素的毒性;二.河豚毒素的毒性;青皮红肉鱼;胆毒鱼类;肝毒鱼类;第二节 真菌毒素及其检测方法;真菌毒素中毒症及其特点;粮食中主要真菌毒素;黄曲霉毒素(AFT);黄曲霉素特点;产毒微生物
黄曲霉:60-94%菌株产毒
寄生曲霉:产毒菌株可达100%
产毒条件
菌体形成孢子
温度范围12-42℃,最适产毒温度33℃
粮食水分为18.5%。
;黄曲霉毒素危害;食品和饲料中黄曲霉毒素的允许残留标准;由多种生长在霉变粮食(玉米、小麦、大米、燕麦等)、花生、蔬菜、水果和饲料中的青霉属和曲霉属的一些种产生的毒素。
;赭曲霉毒素;赭曲霉毒素;伏马毒素;伏马毒素;伏马毒素;玉米赤霉烯酮;毒素检测方法;需要使用剧毒的黄曲霉毒素M1作为标定标准物,对操作人员造成巨大的沾污危险,而且黄曲霉毒素M1标准物质购买十分困难。?
操作过程烦琐、复杂、时间长,劳动强度大。?
仪器设备昂贵、笨重、操作复杂,难以实现现场快速分析。
灵敏度较差,重复性很难得到满意结果。
;薄层层析法(TLC);高效液相(HPLC)法;原理:以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
;抗原:进入动物体内能刺激动物的免???系统发生免疫应答,从而引起动物产生抗体或形成致敏淋巴细胞,并能和抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。
抗体:抗原刺激动物免疫系统,由免疫系统产生分泌的能和相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。;金标试纸法; 胶体金,也称金溶胶,是金盐被还原成原子金后形成的金颗粒悬液。; 胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功能,而不被坏其生物活性,可以与蛋白质等(葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白)等非共价结合,形成胶体金标记物。 ;;夹心法反应原理;金标试纸法;定义:用酶标记抗原或抗体检测液体中未知抗体或抗原的方法。;酶联免疫吸附法;1、将已知抗体吸附于载体上
2、温育后清洗
3、加入可能含特异性抗原的待检液和酶标记的已知抗原液
4、温育后清洗
5、加入酶作用底物
6、测定颜色反应深浅(分别测定两管的吸光度值,计算标本中待测抗原含量)
;双抗体夹心法;获得待分析物的未标定抗体;免疫亲和柱法-最新国标法;免疫亲和柱法;免疫亲和柱法;原理;免疫亲和柱;免疫亲和色谱过程;几种黄曲霉素检测方法的特点;作业;麻痹性毒素(PSP);河豚鱼;食品和饲料中黄曲霉毒素的允许残留标准;毒素检测方法;金标试纸法; 胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功能,而不被坏其生物活性,可以与蛋白质等(葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白)等非共价结合,形成胶体金标记物。 ;夹心法反应原理;免疫亲和色谱过程
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