有机无机分化药化rar等多个文件有机化学chapter 8.pptVIP

肽分子由哪些氨基酸残基组成？ 每种有多少？ 水解 肽 色谱法 aa的种类 计算 各aa的克分子数 肽的 实验式 分子量 肽的 分子式 例:(P517)从鲑鱼精液中得到一个多肽—鲑精蛋白，其水解产物的分析结果如下： 氨基酸残基 克/100克 氨基酸分子量 相对分子数 鲑精蛋白 异亮氨酸 丙氨酸 缬氨酸 甘氨酸 丝氨酸 脯氨酸 精氨酸 1.28 0.89 3.68 3.01 7.29 6.90 86.40 131 89 117 75 105 115 174 1 1 3 4 7 6 51 结论 实验式： 异亮.丙.缬3.甘4.丝7.脯6.精51 鲑精蛋白的分子量约为10000。 分子式为：异亮.丙.缬3.甘4.丝7.脯6.精51 aa残基在肽链中的排列顺序如何？ 末端残基分析 部分水解 末端残基分析就是鉴定肽链末端的氨基酸残基。 该方法必须基于：在两端的残基与其它残基不同，它们彼此也不同。?? N-(2,4 -二硝基苯基)氨基酸 (黄色)(DNP.aa) 其它aa残基 2,4-二 硝基氟 苯法 N-末端残基鉴定: Edman法 异硫氰酸苯酯 取代硫脲 苯基乙内酰硫脲 此法的优点:只断裂N-末端已经与试剂结合的氨基酸残基，而肽链的其余部分不受影响，故可以重复连续测定。 理论上，残基可以一个一个地鉴定，直至测出全部顺序。 实际上，在用酸处理时，通过（缓慢）水解形成各种氨基酸，在鉴定了大约40个氨基酸以后，这种积累的氨基酸对鉴定就有干扰了。 C-末端残基鉴定: 酶催化法 羧肽酶 (从胰脏获得) 羧肽酶可选择性地切除C-末端残基。它只断裂多肽链中与游离羧基相邻的肽键，其余肽键不受影响。 新C-末端 原C-末端aa残基 逐个水解肽链，跟踪测定先后释放的氨基酸残基，便可测定多肽链中氨基酸残基的结合顺序。 例如:胰蛋白酶只能水解Arg（精）和Lys（赖）的羧基肽键；糜蛋白酶能水解芳香族氨基酸的羧基肽键。等等 实际上，用末端残基法测定一个长肽链中全部残基的顺序是行不通的。必须要与部分水解结合应用。 部分水解法 用酸或酶将肽链进行部分水解，生成的碎片则用末端残基分析法加以鉴定。 如：三个氨基酸组成的谷胱甘肽，有六种可能的排列方式，部分水解时生成两个二肽：谷氨酰半胱氨酸和半胱氨酰甘氨酸，很明显，半胱氨酸是在中间，因此，正确的顺序应是谷.半胱.甘(谷氨酰半胱氨酰甘氨酸)。 用上述的方法不仅可以测定肽链的结构,也可测定蛋白质的结构. 测定牛胰岛素分子中全部氨基酸顺序是蛋白质化学的里程碑. 为此, Cambridge大学Frederick Sanger在1958年获得诺贝尔奖. 测定出的天然肽或蛋白质结构必须 通过合成来加以验证 3．肽的合成 肽合成的根本问题是保护氨基 保护氨基的方法有许多，这里介绍其中之一：氯甲酸苄酯（或苄酯基氯或苄氧羰酰氯） 该酰胺与肽链中其它酰氨不同，苄氧羰基能被那些不影响肽键的试剂所断裂：催化氢化，或在冷乙酸中用溴化氢水解。 胺基甲酸 不稳定 例：甘氨酰丙氨酸 该方法可反复使用，每次增加一个 新单元。Vincent du Vigneaud用该 法合成了激素催产素，为此1955年 获得诺贝尔奖。 组氨酸(histidine) 组胺(histamine) 过量组胺在体内可引起变态反应。 由于氨基酸脱羧生成的产物大多呈 碱性，若这些化合物不能正常代谢， 堆积在体内，会引起碱中毒。 （1）碱性（与酸成盐） 3．氨基的化学性质 鉴别之一 （2）与亚硝酸反应 鉴别之一 该反应是定量完成的，只要测定反应 时产生的氮气体积，便可计算出氨基 的数目。此法常用于测定氨基酸、多 肽和蛋白质中伯氨基的含量。 （3）氨基转移的反应 生物体内 接受氨基的 一般为 α-酮戊二酸 谷氨酸 4．与水合茚三酮显色 水合茚三酮 罗曼氏紫 鉴别α-氨基酸 紫色化合物+CO2 水合茚三酮 此反应灵敏度高，是鉴定α-氨基酸简便而 迅速的方法，常用于层析时显色。还可根 据颜色的深浅程度及放出的二氧化碳的量 测定α-氨基酸的含量。 罗曼氏紫 结构的化合物 遇水合茚三酮也能显紫色，如肽等化合物。 注意：① 脯氨酸显黄色 ② 部分RNH2和 含 5．脱水成肽的反应 二酮吡嗪取代物(交酰胺) 二肽 浓HCl 100℃ 肽键 (peptide bond) C-末端 N-末端 甘氨酸 丙氨酸 甘氨酰丙氨酸 H-甘-丙-OH H-Gly-Ala-OH 丙氨酰甘氨酸 -H2O H+ α-氨基酸 —H2O 二肽 —H2O 三肽 …… 多肽 …… 蛋白质 组成肽和蛋白质的氨基酸 叫氨基酸残基 β-氨基酸受热时 γ,δ-氨基酸受热时 γ-内酰胺