表面擦拭微生物限度检查法回收率实验方案.docxVIP

公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N] 公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N] 表面擦拭微生物限度检查法回收率实验方案 湖北天圣康迪制药有限公司GMP文件 文件名称 表面擦拭微生物限度检查法回收率实验方案 文件编码： 共4页 制定人 审核人 批准人 制定日期 年 月 日 审核日期 年 月 日 批准日期 年 月 日 颁发部门 质管部 颁发数量 2份 生效日期 年 月 日 分发部门 及数量 质管部、QC各1份 表面擦拭微生物限度检查法 回收率实验方案 1. 目的 对表面擦拭微生物限度检查法回收率进行验证，确认所采用的方法适合于供试品的微生物限度检查。 2．范围 本方案适用于表面擦拭微生物限度检查法回收率的验证。 3．职责 质管部负责验证方案起草、组织实施、起草验证报告及送审 4. 验证过程 验证用菌种： 4.1.1 菌种名称 编号 来源 大肠埃希菌 【CMCC（B）44103】 金黄色葡萄球菌 【CMCC（B）26003】 白色念珠菌 【CMCC（F）98001】 枯草芽孢杆菌 【CMCC（B）63501】 4.1.2 4.1.3 4.1.4 菌液的制备 4.2.1 取经37℃培养18-24小时，大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌肉汤培养物1ml加9ml生理盐水10倍稀释至10-5～10 4.2.2 取经25℃培养18-24小时的白色念珠菌霉菌液体培养物1ml加9ml生理盐水10倍稀释至10-5～10 回收率的测定： 4.3.1 将经灭菌的开孔面积为20cm2 面接种1ml金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和枯草芽孢杆菌的菌悬液，接种面积为20cm2，并在层流下进行干燥。验证结束后用75%的酒精擦洗染菌表面。 4.3.2 取无菌棉签用 分别培养计数。用同样的方法重复操作三次。 4.3.3 试验要进行三次独立操作，每次试验的回收率要≥ 回收率计算 试验结果下表，棉签擦拭法的结果是每次试验三个平板的平均菌落数再乘以稀释倍数（10）。 4.4.1 金黄色葡萄球菌试验结果表2 实验次数 1号平皿 2号平皿 3号平皿 平均菌落数 检测结果 1 2 3 根据表中的数据，回收率计算如下表3： 实验次数 菌液组菌落数 实验组菌落数 回收率（%） 平均回收（%） 范围 1 2 3 符合要求 □ 不符合要求 □ 检查人 日 期 复核人 日 期 4.4.2 大肠埃希菌 大肠埃希菌试验结果表4 实验次数 1号平皿 2号平皿 3号平皿 平均菌落数 检测结果 1 2 3 根据表中的数据，回收率计算如下表5： 实验次数 理论菌总数 检测结果 回收率（%） 平均回 收（%） 范围 1 2 3 符合要求 □ 不符合要求 □ 检查人 日 期 复核人 日 期 4.4.3 白色念珠菌 白色念珠菌试验结果表6 实验次数 1号平皿 2号平皿 3号平皿 平均菌落数 检测结果 1 2 3 根据表中的数据，回收率计算如下表7： 实验次数 理论菌总数 检测结果 回收率（%） 平均回 收（%） 范围 1 2 3 符合要求 □ 不符合要求 □ 检查人 日 期 复核人 日 期 4.4.4 枯草芽孢杆菌试验结果 枯草芽孢杆菌试验结果表8 实验次数 1号平皿 2号平皿 3号平皿 平均菌落数 检测结果 1 2 3 根据表中的数据，回收率计算如下表9： 实验次数 理论菌总数 检测结果 回收率（%） 平均回 收（%） 范围 1 2 3 符合要求 □ 不符合要求 □ 检查人 日 期 复核人 日 期