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精品文档 精品文档 PAGE PAGE19 精品文档 PAGE LightCycler?480中文操作说明 罗氏医学仪器企业 /应用科学部门 February2008 目录 一.启动机器与软件 3 二.软件设定开启新实验 5 三.样品编写 9 四.结果剖析 12 五.报告 18 六.数据转移至其余计算机 (数据输出与输 入) 19 七.使用者管理 19 一．启动机器与软件 启动机器 机器主开关位于机器右后方。 机器正面两个警告灯代表机器状态。待警告灯(右)由闪烁橘色灯转变成稳定橘色灯，警告灯(左)由橘色转变成绿色(约三分半钟)，表示机器已经启动达成。 左警告灯 右警告灯 机器状态 橘*闪烁* 橘*闪烁* 正在初始化 绿 橘 机器启动达成 96/384孔盘还未放入 绿 橘*闪烁* 96/384孔盘正在放入中 绿 绿 机器启动达成 96/384孔盘已经放入 绿*闪烁* 绿*闪烁* 实验进行中 按压机器正面上唯一的按钮，放入已经封膜达成之  96或  384孔盘。放置 达成后，左右两警告灯都呈现绿色。 启动软件 开启计算机，并以正确的使用者名称与密码登入 Windows。 Username:OPERATOR Password:LC480 开启LightCycler480软件，并输入正确的使用者与密码。 二．软件设定--开启新实验 设定新实验 软件开启后，会进入主画面。点选 “NewExperiment”。 出现实验设定窗口。任何时候需要回主画面的话，点选画面右边的按钮。 设定实验 若要套用设定好的实验步骤 (Template)，请跳至6.。 在实验设定画面上方，先选择适合的 DetectionFormat。选项包含: 此外可再点选“Customize勾”选所需的滤片组合。 输入反响体积:96wellplate范围为10-100ul，而384wellplate范围为5-20ul。 设定实验步骤(Program) 设定program，包含有Pre-incubation,Amplification(PCR),Meltingcurve(optional)与Cooling。利用『+』与『－』增加或删除步骤。 设定循环数目(Cycle)与剖析模式。往常 Amplification(PCR)program设定 成 『Quantification』，而  Melting  Curveprogram  设定成『  Melting Curve』。 设定详尽温度变化  (依据不同实验方法与设计而有所不同  ) 点选各个 program即可设定详尽温度变化步骤，请根据产品说明书来设 定，利用『+』与『－』增加或删除步骤。需要设定的参数包含Target(℃)目标温度，AcquisitionMode(荧光侦测模式)，Hold(hh:mm:ss)停留时间。RampRate℃(/s)为升降温速度，范围如下： RampRate(℃/s)  Heatingup  Coolingdown 96-wellBlock  –℃/s  –℃/s 384-wellBlock  –℃/s  –℃/s 若设定温度低于50℃，请把RampRate调整成℃/s(96well)或℃/s(384well)。 将实验步骤储藏成『Template』以便下次进行套用。点选左下角“SaveAsTemplate”即可把此步骤 储藏起来。 若要进行套用时，请直接点选窗口左下角“ApplyTemplate”，选择欲套用之实验步骤即可。 设定达成后点选 “StartRun”开始进行实验。 跳出档案储藏窗口，请输入欲储藏之文件名称。 实验进行中会进入另一个 Data窗口，窗口下方按键功能如下： EndProgram:结束此Program,进入下一个Program。 +10Cycles:实时增加循环数目。 AbortRun:马上结束此实验，请注意，若按此键，则此次实验的结果将不储藏。 三．样品编写 将样品分群 点选窗口左边的 “SubsetEditor”。 点选“New”新增新的群组，并将其命名。 利用鼠标选用此群组之样品位置，点选窗口右下角“Apply”，此时被选用的样品位置会呈现实心的蓝色，如下列图。 以此方式依序将所有样品群组编写完成。 样品必须分群才可以独立剖析，可是样品是否分群并不影响样品的值。  Cp 编写样品名称 点选窗口左边的 “SampleEditor”。 输入每个位置之样品名称 (Name)与重复 (Repl. Of)。 若要更迅速输入，可直接在左边的图上点选欲编写之样品： 若A1,A2与A3为三重复，在A2与A3Repl.Of字段上都填上A1即为三重复。 在编写过程中，可利用『Ctrl』+『C』复制文字，『Ctrl』+『V』贴上文字。 根据实验剖析模式，编写