蛋白质定量分析实验课件.pptxVIP

1 必须穿白大褂； 2 书包放在实验台的上层架子上； 3 实验报告在实验课后24小时内由组长统一上交； 值日生注意事项强调： 1 清洁实验台上层架子； 2 用湿抹布擦黑板 3 清洁比色皿； 4 将所有移液枪调到最大量程；;;分光光度法;入射光强度为I0，透射光强度为It， 则透光度 T= 吸光度(A)或称光密度(OD)或称消光度(E) A= - lgT;选择待测物质最大吸收峰的波长（lmax） 1.使被测溶液有的适当的光密度（0.1-0.7） 2.干扰影响降至最低限度 3.标准曲线在尽可能大的范围内接近直线;待测溶液的浓度计算;;标准曲线的绘制; 1、标准液浓度的选择：标准液浓度选择一般应能包括待测样品可能变异最低与最高值。5种浓度，成倍增加或等级增加。 2、标准液测定：重复测定2-3次，求其平均值，减少误差;标准曲线法;1.电脑作图。横轴为C，纵轴为OD值。 2.通过原点，尽可能使直线通过更多点，不在直线上的点尽量均匀地分布在直线两边。 3.坐标纸上注明实验项目名称，仪器型号，波长，日期，室温等。 ;蛋白质定量分析即蛋白质溶液的浓度测定； 现实应用：1. 临床检测——血清蛋白浓度测定；2. 科学研究——纯化蛋白的浓度测定；;主要方法;;双缩脲反应;蛋白质的双缩脲反应;管号 试剂;由于单色光透过溶液时，不仅被待测物质所吸收，而且还被比色容器与溶剂以及其它试剂吸收一部分，这部分需用空白管消除； 空白液的做法即用与样本相同的一切试剂，而不含被测定的物质。;;;;管号 试剂(μl);;实验报告