慢病毒的浓缩与纯化peg浓缩法.docxVIP

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  • 2021-07-03 发布于湖南
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Hessen was revised in January 2021 Hessen was revised in January 2021 慢病毒的浓缩与纯化PEG浓缩法 慢病毒的浓缩与纯化——PEG-8000浓缩法 实验试剂 1. NaCl 2. PEG8000 实验设备 1. 高压灭菌锅 2. μm滤头 3. 高速离心机 4. 低温冰箱 实验步骤 1. 5X PEG8000 NaCl配制称取NaCl g; PEG8000 50g溶解在200ml Milli-Q纯水中;121摄氏度 30min 湿热灭绝 30min;保存在4℃。 2. 使用μm滤头过滤慢病毒上清液; 3. 每30ml过滤后的病毒初始液,加入5X PEG-8000 NaCl母液 ml; 4. 每20~30min混合一次,共进行3-5次; 5. 4度放置过夜; 6. 4度,4000 g,离心 20min; 7. 吸弃上清,静置管子1~2分钟,吸走残余液体; 8. 加入适量的慢病毒溶解液溶解慢病毒沉淀; 9. 集中后的病毒悬液分装成50 μl每份,保存在成品管中。用碎干冰速冻后储存在-80 ℃。

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