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专题一 基因工程
1. 基因工程的场所(生物体外)
2. 基因工程操作水平( DNA 分子水平)
3. 基因工程利用的技术(基因重组和转基因技术)
4. 基因工程的原理(基因重组)
5. 基因工程的别名( DNA 重组技术)
6. 基因工程的目的(获得人类需要的基因产物)
7. 基因工程 /DNA 重组技术的基本工具(限制性核酸内切酶(限制酶) , DNA 连接酶,载体)工具酶(限制酶, DNA 连接酶)
8. 限制酶的分布(主要分布在原核生物中)
9. 限制酶的作用部位(磷酸二酯键)
10. 限制酶的特异性(限制酶只能识别特定的双链 DNA 序列,并在特定的切割位点切割)
11. 限制酶的专一性(不同的限制酶识别不同的核苷酸序列)
12. 限制酶作用的结果是(形成黏性末端或平末端)
4 4
13. DNA 连接酶的种类( 2 类。来自大肠杆菌的连接酶(只能催化连接黏性末端) ,来自 T 噬菌体的 T DNA 连接酶(既能催化连接黏性
末端也能连接平末端) )
14. DNA 连接酶的作用位点(磷酸二酯键)
15. DNA 连接酶和 DNA 聚合酶的区别( DNA 连接酶催化连接 DNA 片段,不需要模板, DNA 聚合酶催化连接单个脱氧核苷酸,需要模
板)
16. 载体的种类(质粒(最常用) , λ噬菌体的衍生物,动植物病毒)
17. 作为载体必备的条件(能够在受体细胞中稳定存在并自我复制,对受体细胞无害,有一个或多个酶切位点,具有标记基因)
18. 质粒(独立于拟核以外的小型环状双链 DNA 分子)
19. 标记基因的作用常用的有(供重组 DNA 的鉴定和选择) (四环素抗性基因,氨苄青霉素抗性基因)
20. 基因工程中使用的质粒是否是天然质粒(不是,使用的是人工改造过的天然质粒)
21. 基因工程的基本操作程序的步骤( 4 个,获取目的基因,基因表达载体的构建(核心工程) ,将目的基因导入受体细胞,目的基因的
检测与鉴定)
22. 获取目的基因的方法(从基因文库中获取,利用 PCR 技术扩增,化学方法人工合成)
23. 基因文库的分类(基因组文库和部分基因文库(如 cDNA 文库))
24. PCR (多聚酶链式反应)技术的原理( DNA 复制)
25. PCR 技术操作环境(生物体外,在 PCR 扩增仪中)
26. PCR 与 DNA 复制不同之处(前者不需要解旋酶,高温解旋,后者要用解旋酶解旋;前者的 DNA 聚合酶要求热稳定性高,后者环境
温和不需要热稳定性高的 DNA 聚合酶) (PCR 技术中需要一种特殊的酶: Taq 酶,又叫热稳定性 DNA 聚合酶)
27. 若基因较小,核苷酸序列已知,则可以通过 DNA 合成仪(用化学方法直接人工合成)
28. 基因表达载体(不同生物构建的表达载体有差别,但都需具备四部分:启动子,终止子,目的基因,标记基因) (复制原点)
29. 启动子和起始密码子,终止子和终止密码子(启动子和终止子是 DNA ,起始密码子和终止密码子是 RNA 。启动子和终止子是转录的
起点和终点,起始密码子和终止密码子是翻译的起点和终点) (启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的部位)
30. 转化(目的基因进入受体细胞并在其内稳定维持和表达的过程)
31. 将目的基因导入植物细胞的方法(农杆菌转化法(最常用) ,花粉管通道法,基因枪法)
32. 农杆菌的特点(农杆菌中的 Ti 质粒上的 T-DNA 可转移到受体细胞并整合到受体细胞染色体的 DNA 上)
33. 将目的基因导入动物细胞的方法常用的受体细胞是为什么(显微注射技术) (受精卵)(受精卵全能性高)
34. 将目的基因导入微生物方法( Ca2+ 处理法,用 Ca2+ 处理细胞获得能吸收周围环境中 DNA 分子的感受态细胞)
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