专题二微生物的培养与应用知识点总结.docx

精品学习资料 名师归纳总结 精品学习资料 名师归纳总结 专题二 微生物的培育与应用 学问点 微生物的试验室培育 培育基是人们依据微生物对养分物质的不同需求， 配制出供其生长繁衍的养分基质，是进行微生物培育的物质基础； 培育基按物理性质分为液体培育基（应用于工业或生活生产） ，固体培育基（应用于微生物的分别和鉴定）和半固体培育基（常用于观 察微生物的运动及菌种保藏等） ；按成分分为合成培育基（用成分已知的化学物质配制而成，成分种类比例明确，用于微生物的分别鉴定） 和自然培育基（用化学成分不明的自然物质配制而成，用于实际工业 生产）；按用途分为选择培育基（加入某种化学物质，以抑制不需要微生物生长，促进所需微生物的生长）和鉴别培育基（依据微生物的特点，加入某种指示剂或化学药品，来鉴别不同类别的微生物） ； 培育基的化学成分包括：水，无机盐，碳源，氮源和生长因子等； 334碳源包括 CO2，NaHCO3 等无机碳源和糖类， 石油，花生粉饼等有机碳源；异养微生物只能利用有机碳源；单质碳不能作为碳源；氮源包括 N2，NH，NO- ，NH+等无机氮源和蛋白质，氨基酸，尿素，牛肉膏，蛋白胨 3 3 4 无菌操作技术包括：①对试验操作的空间，操作者的衣着和手，进 行清洁和消毒；②将用于微生物培育的器皿，接种用具和培育基等器具进行灭菌；③为防止四周环境中微生物的污染，试验操作应在酒精灯火焰邻近进行；④试验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与四周的物品相接触； 消毒与灭菌的区分是：消毒指使用较为温顺的物理或化学方法仅杀 死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子） ， 包括煮沸消毒法，巴氏消毒法 （酒精，氯气，石炭酸）和紫外线消毒 法；灭菌指使用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物，包括芽 孢和孢子，包括灼烧灭菌，干热灭菌，高压蒸汽灭菌； 灭菌方法：①接种环，接种针，试管口等使用灼烧灭菌法；②玻璃 器皿，金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；③培育 基，无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅；④ 表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯 ； 制作牛肉膏蛋白胨固体培育基 （ 1）方法步骤：运算，称量，溶化，灭菌，倒平板； 精品学习资料 名师归纳总结 等有机氮源；只有固氮微生物才能利用 N2； 4. 培育基仍需满意 pH，特别养分物质和氧气的要求；例：培育乳酸杆 菌需添加维生素；培育霉菌需将 pH 调至酸性；培育细菌需将 pH 调至中性或微碱性；培育厌氧型微生物需供应无氧的条件； （ 2）倒平板操作的步骤包括：①将灭过菌的培育皿放在酒精灯火焰旁的桌面上，右手拿装有培育基的锥形瓶，左手拔出棉塞；②将锥形瓶 的瓶口快速通过火焰（灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培育基） ；③ 将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙， 再将锥形瓶中的培育基 （约 10～ 精品学习资料 名师归纳总结 精品学习资料 名师归纳总结 20mL）倒入培育皿，立刻盖上培育皿的皿盖；④等待平板冷却凝当然后，将平板倒过来放置，使培育皿盖在下，皿底在上（目的：使培育基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培育基，造成污染）； 倒平板时如不慎将培育基溅在皿盖与皿底上，就这个平板不能用来 培育微生物，缘由是空气中的微生物会在皿盖与皿底上生长； 纯化大肠杆菌的原理是： 用平板划线法和稀释涂布平板法接种， 使集合在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培育基表面形成单个 的菌落（生态学上称种群） ，以达纯化菌种的目的； 平板划线操作时第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环的缘由是：前者防止接种环上可能存在的微生物污染培育物，后者杀死上次划线残留在环上的菌种，使菌种逐步变少以便得到单个菌落；在划线操作终止时，仍旧需要灼烧接种环的缘由是准时杀死接种环上残留的菌种，防止细菌污染环境和感染操作者；在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的缘由是防止接种环温度太高而杀死菌种； 涂布平板操作的步骤包括：①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中；② 取少量菌液，滴加到培育基表面； ③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却 8～ 10s；④用涂布器将菌液匀称地涂布在培育基表面； 菌种的储存：频繁使用，暂时储存接种到固体斜面培育基，在 4℃ 下储存；长期储存菌种用甘油管藏的方法； 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数 尿素是重要的农业氮肥，不能直接被植物吸取；土壤中有一类细菌 能合成脲酶，将尿素分解成氨，被植物吸取利用；尿素最初是从人的尿液中发觉的； 试验室中微生物选择的原理是：人为供应有利于目的菌株生长的条件（包括养分，温度， PH等），同时抑制或阻挡其他微生物生长； 在微生物学中，将答应特定种类的微生物生长，同时抑制或阻挡其