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- 2021-07-09 发布于北京
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C57BL/6J 小鼠细胞核、线粒体分离纯化
细胞核纯化操作步骤:
1) 9 周龄雄性C57BL/6J 小鼠20 只,断颈处死取肝约为24 克;
2) 剪碎肝组织并用冷的PBS 洗2-3 次;
3) 5 倍体积的匀浆液匀浆,一般Dounce loose 5-10 次,tight 3 次,显微镜观察为准;
4) 150 目不锈钢筛望过滤匀浆液,以除去结缔组织和未破碎的大块组织;
5) 将上述过滤好的匀浆液等分为6 份,用30ml 离心管,每份约为20ml;
6) 沉淀细胞核4℃,1000g ,离心10 分钟;上清保留
7) 沉淀重悬于5 倍体积的T
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