第五章发酵工艺过程控制.pptx

第五章 发酵工艺过程控制 ;工艺条件控制的目的：就是要为生产菌创造一个最适的环境，使我们所需要的代谢活动得以最充分的表达。;一、 分批发酵 （batch culture or fermentation）;分批培养中微生物的生长;延滞期（迟滞期）：把微生物从一种培养基中转接到另一培养基的最初一段时间里，尽管微生物细胞的重量（W﹠V)有所增加，但细胞的数量没有增加。;稳定期：培养基中的底物不断被消耗，一些对微生物生长代谢有害的物质在不断积累，微生物的生长速率和比生长速率逐渐下降，直至完全停止，这时就进入稳定期。 生物量增加十分缓慢或基本不变； 微生物细胞的代谢还在旺盛地进行着，细胞的组成物质还在不断变化。;死亡期：细胞的营养物质和能源储备已消耗殆尽，不能再维持细胞的生长和代谢，细胞开始死亡。 微生物细胞的死亡呈指数比率增加。 在发酵工业生产中．在进入死亡期之前应及时将发酵液放罐处理。;2.特点： 整个培养系统与外界没有其它物质交换（O2、CO2、消泡剂、酸碱除外）。 整个过程中菌的浓度、营养成分的浓度和产物浓度不断变化，是一种非稳态的培养方法。;3.分批发酵的优缺点;二、连续发酵（continuous culture） 1. 概念： 微生物培养到对数生长期时，在发酵罐中不断添加新鲜的培养基，同时不断放出等量代谢物，使微生物细胞在近似恒定状态（恒定的基质浓度、恒定的产物浓度、恒定的pH、恒定菌体浓度、恒定的比生长速率）下生长的培养方式。;2. 特点： 菌的浓度，产物浓度，限制性基质浓度均处于恒定状态。; 例题： 下列对微生物连续培养优点的叙述，不正确的是(??? )。 A．能及时连续补充微生物所需的营养物质，提高产量 B．有利于微生物尽快将代谢产物释放到培养基中 C．提高了设备利用率且便于自动控制与管理 D．能及时排除部分有害代谢产物;三、补料分批发酵（fed-batch culture） 介于分批培养和连续培养之间的操作方法。 1.概念：根据菌体生长和初始培养基的特点，在分批培养的某些阶段适当（间歇或连续地）补加培养基，使菌体或其代谢产物的生产时间延长。 ;2.补料方式：;3.补料分批培养的优缺点 优点： 与分批培养相比 (1)解除底物抑制和葡萄糖的分解阻遏效应(葡萄糖效应）。 (2)延长次级代谢产物的生产时间。; 缺点： (1)存在一定的非生产时间。 (2)由于物料的加入增加了染菌机会。;4.补料分批培养应用：;3）分解代谢物阻遏;4）营养缺陷型菌株的培养;柠檬酸合成酶;5）前体的补充;几个实例：;不同操作方式菌体及底物浓度随时间变化的情况;第二节 温度变化及其控制; 嗜冷菌在温度10-20℃下生长速率最大 嗜温菌在30-35℃生长速率最大 嗜热菌在50-60℃生长速率最大 嗜高温菌在80-90℃生长速率最大; 微生物产物的生成与微生物的生长一样受温度的影响，但适于生长和适于产物合成的温度不一定相同；必须分别考察，在考虑培养温度时需要采用折中的办法。;二、温度对发酵的影响;2）影响终产物的质量 例如： 苏云金杆菌的发酵，一般在30-31℃进行，这样形成的晶体毒力强。若发酵温度提高到37℃以上，虽然菌体生长繁殖较快，最终含菌数也较高，但生物毒力较低，直接影响产品的质量。;三、最适温度的选择 最适发酵温度是既适合菌体的生长又适合代谢产物合成的温度。 随菌种、培养基成分、培养条件和菌体生长阶段不同而改变。 ;2.根据生长阶段选择;3、根据培养条件选择; 菌生长快，维持在较高温度时间要短些；菌生长慢，维持较高温度时间可长些。培养条件适宜，如营养丰富，通气满足，那么前期温度可髙些，以利于菌的生长。;利用计算机模拟确定最佳发酵条件，正逐步得到推广应用。 ● 根据计算机模拟对发酵温度最佳点的计算，得到青霉素发酵的最适温度是： 起初5h维持在30℃；随后降到25℃，培养35h；再降到20℃培养85h；最后回升到25℃培养40h放罐。 ● 采用这种变温培养，比在25℃恒温培养青霉素产量提高15%。;四、发酵过程引起温度变化的因素——发酵热;1、生物热Q生物;微生物进行有氧呼吸产生的热比厌氧发酵产生的热多。;2、搅拌热Q搅拌;3、蒸发热Q蒸发 ;1）菌种特性：好氧、厌氧 2）培养基 （成分及配比） 3）发酵阶段 4）搅拌类型及搅拌速度： Q搅拌 5）通气速度 （影响Q蒸发和Q显） 6）罐内外的温差 ;五、温度的控制 一般不需加热，因释放了大量的发酵热，需要冷却的情况多。 用夹套或蛇形管，通冷却水。;;;pH是微生物代谢的综