意义未明的特发性血细胞减少症临床及实验室检测分析.docxVIP

意义未明的特发性血细胞减少症临床及实验室检测分析 意义未明的特发性血细胞减少症临床及实验室检测分析 意义未明的特发性血细胞减少症临床及实验室检测分析 意义未明的特发性血细胞减少症临床及实验室检测分析 陶朝欣1， 邢江涛1， 张玉娜1， 柳江超1， 郭丽改1， 许丽亚1， 朱 芸2 （1. 河北医科大学附属平安医院检验科，河北 石家庄 050021；2. 河北医科大学第二医院检验科，河北 石家庄 050000） 摘要：目的 对确诊为意义未明的特发性血细胞减少症（ICUS）患者进行探讨，了解其疾病的发展及归属。方法 收集ICUS患者骨髓涂片及外周血涂片、免疫抗原CD34检测、骨髓活检、染色体核型分析、融合基因WT1检测结果并进行综合分析。结果 15例ICUS患者病程均＞8个月，表现为1系以上的血细胞减少，有11例是在河北医科大学附属平安医院确诊的，其中2例曾在外院诊断为血小板减少性紫癜，后期因白细胞（WBC）、血红蛋白（Hb）减少，确诊为ICUS，4例是外院确诊后入住本院治疗。15例患者中有1例患者骨髓象表现为红系幼红细胞偶见病态造血，个别患者实验室检查原始细胞数、CD34抗原、融合基因WT1高于参考范围。结论 多种疾病可引起血细胞减少，结合临床表现及实验室检查，意义未明的特发性血细胞减少症最终是否进展为典型的骨髓增生异常综合征（MDS）、再生障碍性贫血（AA）或其他血细胞减少性疾病，目前仍需进行临床动态观察。 关键词：意义未明的特发性血细胞减少症；血细胞减少；骨髓增生异常综合征；病态造血；再生障碍性贫血 意义未明的特发性血细胞减少症[idiopathic cytopenia with uncertain（undetermined）significance，ICUS]，是一组＞6个月血细胞持续1系或多系减少的疾病，能排除血液系统和非血液系统疾病引起的血细胞减少。ICUS是一组尚不能明确诊断的血细胞减少性疾病的一种新的概念[1-2]，ICUS概念的提出得到了从事血液病工作的临床医师及实验室医师的广泛关注[3-5]，我们对确诊为ICUS的15例患者进行了总结分析，动态观察其疾病发展及归属。 收集2021年10月至2021年10月河北医科大学附属平安医院15例ICUS患者标本进行临床及实验室观察。其中男10例，女5例，男女之比为2∶1，年龄4～53岁。 病程均＞10个月，最长8年以上。观察骨髓次数2～5次，患者表现1系或多系血细胞减少而就诊，15例患者多表现为面色苍白、乏力，6例有皮肤出血点。 三、试剂和仪器 1.试剂 Ficoll淋巴细胞分离液（上海化学试剂研究所）；RNA提取试剂盒（北京百泰克公司）；ABL基因上游引物、下游引物、探针（上海生工生物公司合成）；WT1基因上游引物、下游引物、探针（上海生工生物公司合成）；2×Taq Man通用聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）公共体系（北京百泰克公司）；藻红蛋白（phycoerythrin，PE）标记的鼠抗人单抗CD34（美国Beckman-Coulter公司）。 2.仪器 Epics XL流式细胞仪（美国Beckman-Coulter公司）；ABI Prism 7300型PCR仪（美国ABI公司）；752紫外分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司）；数据分析使用EXPO32ADC软件；OLYMPUS CH31-CH51光学显微镜。 四、血细胞形态学观察 骨髓涂片、血涂片经瑞-吉氏复合染液染色后，在光学显微镜下观察血细胞形态。骨髓涂片计数200个有核细胞，计数各系血细胞所占比例，观察血细胞形态学有无异常改变，计数全片巨核细胞总数，并对巨核细胞进行分类，求各型巨核细胞的百分比。血涂片计数100个白细胞，计数各类血细胞所占百分比。组织细胞化学染色：对贫血患者进行铁染色，观察内外铁分布情况。细胞内铁：用油镜计数100个幼红细胞，记录铁粒幼细胞的百分数；细胞外铁：用低倍镜观察骨髓涂片细胞外铁的分布。 取骨髓组织1.5～2.0 cm，用2 mL中性福尔马林固定2 h，盐酸福尔马林脱钙4～6 h，经过梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡浸透后，用石蜡包埋，切片3 μm制片，伊红-苏木素常规染色，在光学显微镜下低倍视野观察骨髓组织结构。 六、流式细胞仪CD34检测 抽取乙二胺四乙酸抗凝的骨髓液2 mL，按操作说明提取细胞悬液。采用CD45和侧向角散射（side scatter，SSC）双参数散点图设门识别原始细胞，血液病治疗及移植国际联合会（the International Society for Hematotherapy and