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Brdu检测细胞增殖实验
实验操作:
铺细胞,每个3.5cm dish 10万个,在37℃、5%CO2孵箱中培养72h(细胞密度至50-60%左右)。
Brdu(5-溴-2′-脱氧尿苷)加入培养细胞中,1mg/ml,标记48h。(量:Brdu以铺满整个dish底面为准。)
固定:PBS洗细胞爬片3次,每次5min,在摇床上晃动清洗,4%PFA固定30min。
变性:将固定好的细胞爬片用PBS洗3次,每次5min,2mol/L的HCl在37℃条件下变性5min,可放置于37℃恒温孵箱,应用封口膜把培养皿封好。(120r/m)
中和:0.1mol/L的硼酸钠(PH8
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