药学专业药物分析第十三章生化药物和基因工程药物分.pptxVIP

第十三章 生化药物和基因工程药物 分析概念 ;基本要求; 一、防病、治 病的三大药源; 1．生化药物： 例：氨基酸、多肽、蛋白质、酶等。;2. 基因工程药物： 以DNA重组技术生产的蛋白质、多肽、酶、激素、疫苗、单克隆抗体和细胞生长因子类药物。;DNA重组技术（基因工程）：生产过程为;二、种类;2．基因工程药物的种类 1）激素类及神经递质类药物： 人生长激素释放抑制因子、人胰岛素、人生长激素 2）细胞因子类药物： 人干扰素人白细胞介素、集落刺激因子、促红细胞生成素 3）酶类及凝血因子类药物; 三、特点 1. 生物体的基本生化成分  2. 分子量大: 分子量测定  3. 结构难确证  4. 全过程的质量控制：原料、生产过程、 最终产品 5. 生物活性检查; 6. 安全性检查 7. 效价（含量）测定： 理化法：有效成分的含量 效价测定和酶活力测定：有效成分 的生物活性; 生化药物和基因药物质量控制的项目：  来源与种类 纯度 性状 干燥失重或水分 鉴别 炽灼残渣 氨酸组分分析 生物活性 肽图 热源试验 糖含量 含量分析 ; ;（一）理化鉴别法 1.化学鉴别法： 例：溶菌酶 - CONH- +Cu2+ 络合显色; 2.紫外分光光度法 溶剂：0.01mol/L盐酸 例：三磷酸腺苷二钠 浓度：20μg/ml 判断： λmax：257±1nm A250/A260：0.17～0.27。 3. HPLC法： 利用对照品溶液和供试品溶液色谱图的保留 时间和肽图谱的一致性进行鉴别。 ; 4.酶法： 例：尿激酶的鉴别---气泡上升法 原理：; 方法： 取小试管，加入尿激酶巴比妥溶液、牛纤维蛋白原溶液，再依次加入牛纤维蛋白溶酶原溶液、牛凝血酶溶液，迅速摇匀，立即置37℃±0.5℃恒温水浴保温，记时。反应系统在30～40秒内凝结，凝结块内有气泡生成，15分钟内凝结块溶解，当凝结块溶解时，气泡逐渐上升。以0.9%氯化钠作空白，同法 操作，凝结块在2小时内不溶。 ;5. 电泳法：以肝素鉴别为例。; 6. 生物法： 利用生物体进行试验来鉴别药物。 例：家兔惊厥试验鉴别胰岛素。 利用胰岛素的降糖作用。给家兔大剂量注射胰岛素，家兔惊厥，迅速静注50%GS，惊厥停止。;（二）杂质检查 一般杂质检查 特殊杂质检查：原料药纯度分析 生产过程中杂质的检查 1. 原料药纯度分析： 多糖类-----低聚糖、核酸、蛋白质 酶类药物-----酶催化反应基本产物的分析， 具有一定活性的其他有关酶的检查。;例：胰蛋白酶中糜蛋白酶的检查 选用N-乙酰-L-酪氨酸乙酯作底物进行糜蛋白酶的限度检查。糜蛋白酶的限度为2500个胰蛋白酶单位中不得大于50单位，按每1mg胰蛋白酶为2500个单位和每1mg糜蛋白酶为1000单位，折算成重量，则糜蛋白酶的限度为5%（g/g）。1:1000=x:50 x=0.05（mg） L=0.05/1=5%  2. 生产过程中杂质的检查; （三）安全性试验 热源试验  异常毒性试验 :急性毒性物质  过敏试验：异性蛋白 降压物质试验：导致血压降低的杂质、组 胺、类组胺; 无菌试验：活菌 基因工程药物中可能杂质与污染物检查 来源于宿主细胞的残留DNA，外源性杂质 致突变试验 生殖毒性试验;（四）含量测定生化药物和基因药物的含量表示方法：百分含量：适用于结构明确的小分子药