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文昌鱼石蜡连续切片的制作和苏木精 伊红染色
文昌鱼石蜡连续切片的制作和苏木精lowbar;伊红染色
解剖学研究年第卷第期·技术方法·
文昌鱼石蜡连续切片的制作和苏木精-伊红染色
广州510080)
利用LeicaEG1150分体
(中山大学中山医学院人体解剖学教研室,
介绍文昌鱼石蜡连续切片的制作和苏木精-伊红(HE)染色的方法。
式石蜡包埋机;LeicaVT1000S手动轮转切片机;LeicaHI1210摊片机;LeicaHI1220烘片机制作文昌鱼石蜡连续切片并进行HE染色。依据对脱水和透明过程中文昌鱼外观的变化以及镜下切片结果的反复比较,总结出各个步骤的时间参数。结果
利用上述方法获得清晰的文昌鱼石蜡连续HE染色切片,我们选择了头部、胸部、腹部、尾部四个有代表性的文昌鱼
本文成功建立文昌鱼石蜡连续切片的制作和
断面,在片中可以清楚地分辨脊索、神经管、鳃、卵巢、肌节、肠等结构。结论
HE染色方法,并为研究脊椎动物的起源提供基础资料。
苏木精-伊红染色
Serialparaffinsectionandhematoxylin-eosinstainingoftheAmphioxus
【Abstract】
LEIJia-yao,XUYe,GUHuai-yu.Departmentof
Anatomy,ZhongshanSchoolofMedicine,SunYat-senUniversity,Guangzhou,510080,China
Objective
Tointroduceamethodforserialparaffinsectionandhematoxylin-eosinstainingoftheAmphioxus
Methods
LeicaEG1150ModularTissueEmbeddingCenter(consistingoftheLeicaEG1150CColdPlateandtheLeica
EG1150HHeatedParaffinDispensingModule),LeicaVT1000SVibratingBladeMicrotome,LeicaHI1210-Waterbath,LeicaHI1220-FlatteningTablewereutilizedtoproducetheserialparaffinsectionsaswellasobtaininghematoxylin-eosinstainingoftheAmphioxus.BycomparingtheappearancechangesandmicroscopicimagesoftheAmphioxusrepetitivelystepbystep,wefoundouttheappropriatetimecourseofeveryprocedure.Resultsneuraltube,
pharyngealgill,
myomere,
Weattainedclearhematoxylin-eosinstainedparaffinsectionsinthat
Conclusion
way.Thesectionsofhead,thorax,abdomenandtailwereselectedasthefourrepresentatives,thestructuresofnotochord,
intestineoftheAmphioxuswereclearlydistinguished.
establishedasuccessfulmethodforserialparaffinsectionandhematoxylin-eosinstainingofAmphioxus,andprovidedanewwayforthefurtherresearchinoriginofvertebrates.
【Keywords】
Amphioxus;Serialparaffinsection;Hematoxylin-eosinstaining
文昌鱼是现存的与脊椎动物原始祖先最接近的无脊椎动物,长期以来一直作为研究动物进化和胚胎发育的典型材料[1-2]。目前,文昌鱼已经被广泛用于不同物种之间的比较基因组学研究、免疫学研究等。近50年来,我国在文昌鱼生物学研究方面取得很大进展[2-3]。从形态学上说,文昌鱼没有骨质骨骼,脊索作为它的全身支柱,并由许多柱状细胞所在组成的具有韧性的膜状结构所紧密包围,内部脏器容易在组织处理过程中破
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