分子生物学朱玉贤笔记.docVIP

分子生物学朱玉贤笔记 分子生物学朱玉贤笔记 PAGE / NUMPAGES 分子生物学朱玉贤笔记 第二章 染色体与 DNA 染色体（ chromosome）是细胞在有丝分裂时遗传物质存在的特定形式，是间期细胞染色质构造密切包装的结果。 真核生物的染色体在细胞生活周期的大多半时间里都是以染色质 (chromatin) 的形式存在的。 染色质是一种纤维状构造， 叫做染色质丝，它是由最基本的单位—核小体 (nucleosome) 成串摆列而成的。 原核生物 (prokaryote) ：DNA 形成一系列的环状附着在非组蛋白上形成类核。 染色体由 DNA 和蛋白质构成。 蛋白质由非组蛋白和组蛋白（ H1,H2A,H2B,H3,H4 ） DNA 和组蛋白构成核小体。 组蛋白的一般特征： P24 ①进化上的守旧性 ②无组织特异性 ③肽链氨基酸散布的不对称性：碱性氨基酸集中散布在 N 端的半条链上。 ④组蛋白的可修饰性 :甲基化、乙基化、磷酸化及 ADP 核糖基化等。 H5 组蛋白的特别性：富含赖氨酸（ 24%）(鸟类、鱼类及两栖类红细胞染色体不含 H1 而带有 H5) 组蛋白的可修饰性 在细胞周期特准时间可发生甲基化、乙酰化、磷酸化和 ADP 核糖基化等。 H3、H4修饰作用较广泛， H2B 有乙酰化作用、 H1 有磷酸化作用 。 所有这些修饰作用都有一个共同的特色， 即降低组蛋白所携带的正电荷。 这些组蛋白修饰的意义：一是改变染色体的构造， 直接影响转录活性； 二是核小体表面发生改变，使其余调控蛋白易于和染色质相互接触，进而间接影响转录活性。 2、 DNA DNA 的变性和复性 ■变性（ Denaturation) DNA 双链的氢键断裂， 最后完好变为单链的过程称为变性。■添色效应 (Hyperchromatic effect)在变性过程中， 260nm 紫外线汲取值先迟缓上 升，当达到某一温度时忽然上涨，称为添色效应。 ■融解温度（ Melting temperature ，Tm ) 变性过程紫外线汲取值增添的中点称为融解温度。 生理条件下为 85-95℃ 影响因素： G+C 含量， pH 值，离子强度，尿素，甲酰胺等■复性（ Renaturation) 热变性的 DNA 迟缓冷却，单链恢复成双链。 ■减色效应 （Hypochromatic effect) 跟着 DNA 的复性，260nm 紫外线汲取值降低的现象。 2) C 值失常现象（ C-value paradox) C 值是一种生物的单倍体基因组 DNA 的总量。 真核细胞基因组的最大特色是它含有大批的重复序列，并且功能 DNA 序列大多被 不编码蛋白质的非功能 DNA 所分开，这就是有名的 “C值失常现象 ”。 （四）核小体 (nucleosome)：用于包装染色质的构造单位，是由 DNA 链环绕一个组 蛋白核 [ （H2A 、 H2B 、H3、H4)*2 的八聚体】构成的。 1、原核生物基因组构造特色 ● 基因组很小，大多只有一条染色体 ● 构造简炼 — ● 存在转录单元 (trnascriptional operon) ●多顺反子 (polycistron) 重叠基来由基因内基因、部分重叠基因、一个碱基重叠构成。 2、真核生物基因组构造特色 ●真核基因组构造宏大 3×109bp、染色质、核膜 ●单顺反子 ●基因不连续性 断裂基因（ interrupted gene ）、内含子 (intron) 、 外显子 (exon) ●非编码区许多 多于编码序列 (9:1) ● 含有大批重复序列 ■ 不重复序列 /单调序列：在基因组中有一个或几个拷贝。真核生物的大多半基因在 单倍体中都是单拷贝的。如：蛋清蛋白、血红蛋白等 功能：主假如编码蛋白质。 ■ 中度重复序列：在基因组中的拷贝数为 101～104。如： rRNA 、tRNA 一般是不编码蛋白质的序列，在调控基因表达中起重要作用 ■ 高度重复序列：拷贝数达到几百个到几百万个。 ●卫星 DNA ：A?T 含量很高的简单高度重复序列。 1、 DNA 的一级构造：指 4 种脱氧核苷酸的连结及其摆列次序， DNA 序列是这一 观点的简称。碱基序列 2）特色： ●双链反向平行配对而成 ●脱氧核糖和磷酸交替连结，构成 DNA 骨架，碱基排在内侧 ●内侧碱基经过氢键互补形成碱基对（ A：T ，C：G）。 2、 DNA 的二级构造：指两条多核苷酸链反向平行环绕所产生的双螺旋构造。 2）分类： 右手螺旋： A-DNA ，B-DNA 左手螺旋： Z-DNA 3、 DNA 的高级构造：指 DNA 双螺旋进一步歪曲环绕所形成的特定空间构造。是一种比双螺旋更高层次的空间构象。 2）主要形式：超螺旋构造（正超螺旋和负超螺旋） （一） DNA 的半保