微生物农药经典.pptxVIP

第4章 现代微生物农药;微生物农药的定义与优点;4.1 微生物杀虫剂 按杀虫剂的来源，微生物杀虫剂可分为：细菌杀虫剂、杀虫抗生素、真菌杀虫剂、病毒杀虫剂、原生动物杀虫剂、昆虫病原线虫制剂和微生物杀线虫剂等类型。 4.1.1 细菌杀虫剂 细菌杀虫剂主要包括：苏云金芽孢杆菌杀虫剂、球形芽孢杆菌杀虫剂、金龟子芽孢杆菌杀虫剂和缓病芽孢杆菌杀虫剂等。 4.1.1.1 苏云金芽孢杆菌（Bt） 苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis），是能形成芽孢的革兰氏阳性杆菌，在芽孢形成的同时可形成具有杀虫活性的、由蛋白质组成的伴胞晶体 。Bt对鳞翅目、双翅目、鞘翅目昆虫以及原生动物门、螨类等类群中的一些种类有活性 。;;;Mode of action ;1901年日本的石渡繁胤分离到猝倒芽孢杆菌 1911年Berliner分离到类似的杆菌，并命名为苏云金芽孢杆菌 1938年第一种商品化的苏云金芽孢杆菌杀虫剂在法国得到应用 二十世纪90年代以来，第二代细胞工程杀虫剂和第三代基因工程杀虫剂相继投入市场 （一）苏云金芽孢杆菌的杀虫成分 按其存在的部位，可分为： 外毒素：该菌在生长过程中分泌到胞外的代谢产物 内毒素：亦称为晶体毒素，是以蛋白质晶体结构的形式存在于细胞内，并随芽孢囊的破裂和芽孢的释放而释放到胞外，是主要的杀虫毒素。; 活性物质 ① α-外毒素（磷脂酶C）：一种热不稳定的对昆虫肠道有破坏作用的酶。 ② β-外毒素(thuringiensin) 即苏云金素，是一种热稳定的外毒素。通常在营养生长阶段产生并分泌到胞外。 ③ δ-内毒素：伴胞晶体毒素，有一至几种杀虫晶体蛋白组成的特异性的晶格结构。 ④ γ-外毒素：对昆虫的毒力还不确定。 ⑤ ZwA（Zwittermicin A) ：一种抗生素物质，对植物病原细菌和真菌有抑菌作用，同时对Bt杀虫晶体蛋白毒素有协同杀虫活性。 ⑥ 营养期杀虫蛋白(VIP)：对小地老虎、甜菜夜蛾等昆虫有杀虫活性。 ⑦ 芽孢：可增强其他毒素，特别是δ-内毒素的杀虫活性。 ;（二）杀虫晶体蛋白基因的分类 ; 45% 45-78% 78-95% 95% ;（三）重要的亚种和杀虫基因 1. 库斯塔克亚种（HD-1）和cry1A杀虫晶体蛋白基因：对鳞翅目昆虫有特异性的杀虫活性。大多数含有cry1Aa、 cry1Ab和 cry1Ac，其中cry1Ac基因是毒力最高的基因。 将cry1Ac基因插入到能在植物维管束定植的内生细菌的基因组中，通过细菌繁殖产生杀虫毒素蛋白，提高对玉米螟的防治效果。 2. 鲇泽亚种和cry1C基因：鲇泽亚种含有特征性的cry1C基因，是对灰翅夜蛾等害虫毒力最高的基因。 3. 拟步行甲亚种和cry3A基因：拟步行甲亚种主要用于防治鞘翅目昆虫。该亚种含有cry3A基因，用于重组微生物和转基因植物，防治鞘翅目昆虫。 4. 以色列亚种和杀蚊毒素蛋白基因：防治伊蚊、库蚊和按蚊等蚊虫。该亚种含有至少cry4A、 cry4B、 cry11A和cyt1A四个杀虫基因， Cyt1A晶体蛋白对其他基因的产物具有协同杀蚊作用。 5. 对动植物寄生线虫有毒的基因：主要是cry5和cry6等。杀线虫剂。;4.1.1.2 球形芽孢杆菌（ (Bacillus sphaericus, Bs） 1965年Kellen等首次分离。为好氧的产芽孢细菌，普遍存在于世界各地的土壤和水生环境中，对蚊幼虫特别是库蚊具有高毒力。 主要活性成份： 自身产生的一至多个具蛋白质晶格结构的伴胞晶体，含有两种主要蛋白质，分别为51kDa和42kDa，单独对幼虫没有毒性，却都是产生毒性所必需的。这种毒素称为二元毒素（binary） 。 晶体在中肠的碱性pH环境中溶解，二元毒素51kDa和42kDa分别加工成43kDa和39kDa蛋白。毒蛋白结合于中肠上皮细胞，导致幼虫进食受到抑制，最终导致死亡。 毒素通过对敏感幼虫细胞中特定蛋白的ADP-核糖基化发挥作用。;4.1.1.3 金龟子芽孢杆菌 （Bacillus popilliae） 各类金龟子科甲虫的病原菌 ，杀虫机制是通过细菌在血管内的快速繁殖，引起败血症，而使幼虫致死。 金龟子芽孢杆菌使用的局限性是宿主太专一，商业化获得芽孢的唯一途径是细菌在金龟子幼虫中生长。;4.1.2 杀虫抗生素 杀虫抗