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肿瘤细胞侵袭试验TumourInvasionAssay原理及实验步骤 肿瘤细胞侵袭试验TumourInvasionAssay原理及实验步骤 PAGE / NUMPAGES 肿瘤细胞侵袭试验TumourInvasionAssay原理及实验步骤 肿瘤细胞侵袭试验（ Tumour Invasion Assay ）原理和实验步骤 一、 原理 Matrigel 是从小鼠 EHS 肉瘤中提取的 基质成分 ，含有 LN、IV 型胶原 、 接触蛋白和肝素硫 酸多糖 ，铺在 无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯 滤膜上， 能在 DMEM 培养基中 重建形 成膜结构， 这种膜结构与 天然基质膜结构 极为相似。 滤膜孔径一般为 8um ，而且膜孔都被 Matrigel 覆盖 ，细胞不能自由穿过， 必须分泌水解酶 ， 并通 过变形运动 才能穿过这种铺有 Martrigel 的滤膜，这与体内情况较为相似。 铺有 Martrigel 的滤膜 放在以 Blind Well 腔或 MICS 腔上下室之间 ，铺有 Martrigel 面朝向上 室， 在下室中加有趋化剂 ，如一定浓度的 LN 、FN 或小鼠 3T3 条件培养液或人睾丸上皮成 纤维细胞培养液， 上室加入重悬的瘤细胞 ，具有 侵袭能力的细胞 在趋化剂诱导下开始穿膜运 动。 细胞穿膜所用的时间与 Martrigel 的用量有关 ，选择 25ugMartrige