2018仪器分析高效液相色谱法的应用《仪器分析》课程教案-模块三项目三高效液相色谱法应用-1.docVIP

教学方案 《仪器分析》 教学方案 课程名称： 仪器分析 课程代码： 课程性质： 专业课程 课程学时： 60学时 课程学分： 4学分 黑龙江农业经济职业学院 食品检测技术专业/食品加工技术专业 2017年07月制定 教学方案 模块三 高效液相色谱法 项目三高效液相色谱法应用-1 教学方案 授课班级 课时 2学时（90分钟） 授课时间 授课地点 多媒体教室 教学工具 投影仪 教学目标 专业能力：掌握高效液相色谱法定性及定量分析的概念、应用、定量分析方法及相关应用 社会能力：诚实守信、法律意识 方法能力：作决定和计划能力、时间管理的能力 教学方法 项目教学、理论讲授 教学过程 内容 教学环境 时间分配 下发任务单 教室给每位学生发放工作任务单，课程结束后上交。 教室 5分钟 组织教学 知识要点讲授 介绍本次课程的主要内容，本次课程重点与难点。讲授高线液相色谱法的定性定量分析的相关基础知识及计算等等。 教室 60分钟 任务单的填写 学生根据工作任务单要求，独立完成任务单的填写 教室 10分钟 上交任务单，共同完成任务单内容的讨论及答疑 上交任务单，由学生根据任务单的问题进行回答，教师指出问题讲解。针对本次课程的内容学生进行提问，教师答疑。 教室 15分钟 总计 90分钟 附件1 工作任务单 任务名称 姓名 填写时间 查阅材料 高效液相色谱法定量分析方法有哪些 高效液相色谱法的定量分析中的应用 附件2 教学内容 项目三高效液相色谱法应用-1 一、高效液相色谱法定性与定量 一）定性分析 （1）根据色谱保留值进行定性分析 色谱保留值是色谱 定性分析的依据，根据色谱保留值进行定性分析，但要求柱效要高 ，混合物组分简单，且已知，可一一分离。即使这样，也只能做其它定性方法的旁证。该方法采用的指标为保留指数。 在一定色谱条件（固定相和操作条件）下，各物质均有其确定不变的保留值，因此，可利用保留值的大小进行定性分析。对于较简单的多组分混合物，若其色谱峰均能分开，则可将各个峰的保留值，与各相应的标准样品在同一条件所测的保留值一一进行对照，确定各色谱峰所代表的物质。这一方法是最常用、最可靠的定性分析方法，应用简便。但由于能用于色谱分析的物质很多，不同组分在同一固定相上色谱出现的时间可能相同，仅凭色谱峰对未知物质定性有一定的困难，因此其应用常限制于当未知物已被确定可能为某几个化合物或属于某种类型时作最后的确证。 但有些物质在相同的色谱条件下往往具有近似甚至完全相同的保留值，因此，其应用常限制于当未知物已被确定可能为某几个化合物或属于某种类型时作最后的确证。倘若得不到标准物质，就无法与未知物的保留值进行对照，这时，可利用文献保留值及经验规律进行定性分析。对于组分复杂的混合物，则要与化学反应及其它仪器分析法结合起来进行定性分析。 二）内标法 用含对标准品和内标物质的标准品溶液所得色谱峰响应值，按下式计算出校正因子（f）： 校正因子（f）= 式中As和AR分别为内标物质和标准品的峰面积或峰高；Cs为加入内标物质的浓度；CR为加入标准品的浓度。 再根据含内标物质的标准品溶液色谱峰响应值，计算含量（Cx）： 含量（Cx）= 式中Ax和As分别为标准品和内标物质的峰面积或峰高；Cx为样品（或其杂质）的浓度；Cs为加入内标物质的浓度。或根据稀释倍数和取样量折算成百分含量。 2.外标法 按各品种项下的规定，精密称（量）取标准品和样品，配制成溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对标准品和样品待测成分的峰面积（或峰高），按下式计算含量： 含量（Cx）= 式中各符号意义同上。 3.峰面积归一化法 按食品样品中组分检测标准有关项下进行峰面积归一化法求组分含量的。 归一化法定量：归一化法定量的依据是，当样品的所有组分均色谱柱分离出并被检测器检测出来而显示各自的时色谱峰，而且知道各组分的校正因子，那么就可以用此法计算出各组分的含量，其公式为： 所以归一化法测定时，就是在测知组分的相对校正因子后，将样品中所有组分的峰面积测出，按此式计算各组分的百分含量 归一化法的特点是方法简便、准确；进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大； 尤其使用与多组分的同时检测。仅适用于试样中所有组分全出峰的情况，不适用于有的组分不能出峰的试样的检测。 式中，∑Ai为被测含量组分峰面积，∑A为参与计算的全部峰面积（溶剂峰和其他干扰。