弧菌和弯曲菌免疫学管理知识.pptx

弧菌和弯曲菌;第一部分 弧 菌;概 述;霍 乱 弧 菌;霍乱弧菌包括两个生物型：古典生物型（Classical biotype）和埃尔托生物型（EL-Tor bio-type）。这两种型别除个别生物学性状稍有不同外，形态和免疫学性基本相同，在临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。自1817年以来，全球共发生了七次世界性大流行，前六次病原是古典型霍乱弧菌，第七次病原是埃尔托型所致。 ;　1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株（0139），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同，但不能被01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。该菌株在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。;一、生物学性状（一）形态染色;图注：霍乱弧菌的鞭毛（↑）和它可溶解的鞘膜（↑↑） 负染，×3 100 ;;（二）培养特性;;常用的选择培养基为硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS），霍乱弧菌在其中可形成较大的菌落，因发酵蔗糖产酸而使菌落呈黄色。;;（三）生化反应;El Tor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌生化反应有所不同;霍乱弧菌的抗原结构;2．分群和分型：;O1群霍乱弧菌的血清分型;生物型：O1群霍乱弧菌有古典生物型和E1 Tor 生物型之分，两个生物型具有相同的血清型。我国流行以El Tor、小川型霍乱弧菌为主。 噬菌体分型： 对噬菌体的敏感性进行分型，其中较为实用的是第Ⅳ组和第Ⅴ组噬菌体。;霍乱弧菌两个生物型的鉴别;霍乱弧菌的变异性;（六）抵抗力;二、致病性和免疫性1．致病物质;霍乱肠毒素;;致病机理;ATP → cAMP↑ ;2．所致疾病;3．免疫性;三、微生物学诊断;检验程序;（三）检验方法及鉴定1．直接镜检：;3）涂片染色： 　　革兰氏染色阴性 　　并成鱼群状排列的弧菌。;2．快速诊断：;3．细菌分离培养1） 直接分离培养：;4． 鉴定：;2） 形态学检查：取纯培养物涂片革兰氏染色，观察菌体形态及染色性。用悬滴法或半固体穿刺法检测动力。 3） 生化反应：霍乱弧菌氧化酶试验、靛基质试验、粘丝试验和霍乱红试验均阳性。 ①粘丝试验：用于测定霍乱弧菌形成粘丝的特性。将0.5％去氧胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成浓厚菌液，1min内悬液由混变清，并变得粘稠，以接种环挑取时可以拉出丝来。霍乱弧菌古典生物型和El Tor生物型均呈阳性。 ;;② 霍乱红试验：出现蔷薇色，为霍乱红试验阳性。由于霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应，故无特异性。 　　（霍乱弧菌含有色氨酸酶，能分解色氨酸产生吲哚，霍乱弧菌液能还原硝酸盐为亚硝酸盐，因此当霍乱弧菌培养在含有硝酸盐成分的蛋白胨水中，所产生的亚硝酸盐可与吲哚结合成亚硝酸吲哚，滴加浓硫酸即可出现蔷薇色，称为霍乱红试验阳性） ③ O/129敏感试验：将O/129（2，4二氨基－6，7－二异丙基喋啶）药敏纸片（10－150μg）贴在接种有待测菌的琼脂平板上作纸片扩散试验，凡药物纸片周围出现抑菌环者为敏感。;4） 霍乱弧菌的分型鉴别试验： ①血清分型：用小川型和稻叶型单价诊断血清作玻片凝集。与小川型血清凝集而与稻叶型血清不凝集者为小川型，反之为稻叶型。在两个单价血清中均有明显凝集者为彦岛型。 ②生物型别的鉴定：目前，两型主要依靠第Ⅳ组霍乱噬菌体裂解试验进行鉴别，并辅以多粘菌素敏感试验、鸡红细胞凝集试验、V－P试验和溶血试验。 ;⒈ 第Ⅳ组霍乱噬菌体裂解试验： 第Ⅳ组霍乱噬菌体常规稀释液（106/ml）一般仅裂 解古典型，而不裂解El Tor型。 ⒉ 多粘菌素B敏感试验： 取被检菌2-3h肉汤培养物点种到含药营养琼脂平板上（多粘菌素B50U／ml）,37℃培养24h，El Tor生物型生长，而古典型敏感。;;⒊ 鸡红细胞凝集试验：在玻片上滴加生理盐水一滴，取被检菌18-24h培养物少许在盐水中制成浓厚菌悬液，然后加一滴2.5％鸡红细胞悬液，充分混匀， ;鉴定要点：;四、防治原则;第二部分 弯曲菌属;弯曲菌属(Campylobacter)细菌是一类微需氧、不分解糖类、氧化酶阳性、菌体弯曲呈逗点状、S型或螺旋状、有动力的革兰氏阴性菌。 对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种，前者是人类腹泻最常见的病原菌之一，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。 本节主要以空肠弯曲菌介绍本属的生物学特性和检验方法;一、生物学性状;（二）培养特性 为微需氧菌，在含2.5～5%氧和10%CO2的环境中生长最好。最适温度为37～42℃。在正常大气或无氧环境中均不能生长。 本菌营养要求高，需加入血液、血清才能生长。 在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无色半透明毛玻璃样小菌落，单个菌落呈中心凸起，周边不规则，无溶血现象