细胞细胞器及生物大分子.pptVIP

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  • 2021-08-04 发布于湖北
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上述四种生物体细胞色素C的四级结构 蛋白质分析 A.纯化——获得用于研究的足够样品。 层析(根据大小)、电泳(根据电荷)、疏水层析、亲和层析、重组技术(加入纯化标签) B.测序——确定纯化蛋白质的初级结构。蛋白质测序 蛋白质测序利用Edman化学降解法(就是用化学试剂把肽链N端最后一个氨基酸降解下来,然后用层析的手段分离。然后再降解下一个,如此循环) 蛋白测序仪 C.质量测定——确定目标蛋白的分子质量 D.X-射线晶体衍射和核磁共振——确定目标样品的四级结构。 亲和层析—— 酶与底物作用,抗原抗体结合,配体受体结合等 质谱分析——将分子气化并离子化,再根据其在电磁场内偏离的程度来确定其大小。 极其准确但昂贵,可以测定小于100KD的蛋白,有助于检测翻译后修饰 以四种碱基构成的脱氧核苷酸或核苷酸为基本单位通过3,5-磷酸二酯键连接成链状结构构成其一级结构 核酸的理化性质 DNA序列测定常用方法有如下3种: Maxam-Gilbert化学裂解法 化学裂解(直读,Sanger双脱氧末端法也是直读法)法是Maxam和Gilbert等人1977年创建的,用来测定DNA序列。化学法是用化学试剂在A、G、C、T处特定地裂解DNA片段,产生一簇各种长度的短链(等差数列 n=1),经过PAGE和放射自显影后,可以直接读出DNA的顺序。 某些试剂能修饰或破坏D

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