VFA的测定方法及标准曲线.pdf

VFA 的测定方法及标准曲线 VFA 测定的方法 指 标 挥发性脂肪酸 VFA ，包含乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸 检测方法 液相色谱法 分析仪器 高效液相色谱仪， HPLC （Agilent 1200, 安捷伦科技有限公司，美国） -1 检测条件 流动相： %稀磷酸，流速 mL min ； 检测器：紫外检测器，波长 =210 nm ； 分析柱： Shodex RSpak KC-811 有机酸专用分析柱（ 6 μm, 8 × 300 mm） + KC-G 保护住（ 10 μm, 6 × 50mm ），柱温箱恒定 55 ℃； 进 样：自动进样器进样，进样量 20 μL ； 定 量：基于峰面积的外标法。 样品处理： 过 μm 水相滤膜后转移至棕色自动进样瓶。 注：乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸出峰时间分别为、 、、、、。 实验仪器 高效液相色谱仪（ Agilent 1200, ） VFAs 标准系列配置 选取分析纯或色谱纯的乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸六种标准品。 首先配置 5g/L 的标准储备液 5g/L （5000 mg/L ）标准储备液（混标）配置方法（ 100mL 备用） 乙酸 丙酸 异丁酸 正丁酸 异戊酸 正戊酸 密度 取用量 （g） 取用体积 （mL） 定容体积 100 mL 100mL 100mL 100mL 100mL 100mL （mL） 然后再配制 VFAs 标准系列 VFAs 标准系列配制 编号 V-ST1 V-ST2 V-ST3 V-ST4 V-ST5 V-ST6 V-ST7 浓度 (mg/L) 0 25 50 100 250 500 1000 储备液体积 0 （mL） 去离子水体积 0 （mL） 总体积 8 8 8 8 8 8 8 （mL） VFAs 标线 通过对标准样品的 VFAs测定，做出 VFAs 的标准曲线。 整理后的数据 VFAs 标线 VST1 VST2 VST3 VST4 VST5 VST6 VST7 浓度（ mg/L ） 0 25 50 100 250 500 1000 乙酸 0 234 931 ( 峰面积 ) 丙酸 0 225 890 ( 峰面积 ) 异丁酸