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单域抗体的研究和应用进展 单域抗体的研究和应用进展 本文关键词：抗体，进展，研究 单域抗体的研究和应用进展 本文简介：摘要：传统IgG抗体分子一般由轻链和重链组成，轻链包含一个可变区〔VL〕和一个恒定区〔CL〕,重链包含一个可变区〔VH〕和3个恒定区〔CH1,CH2,CH3〕.单域抗体〔singledainantibody,sdAb〕,是指缺失抗体轻链，而只有重链可变区的一类抗体，因其分子量小，也被称为纳米抗体 单域抗体的研究和应用进展 本文内容： 　　摘要：传统Ig G抗体分子一般由轻链和重链组成， 轻链包含一个可变区 〔VL〕 和一个恒定区 〔CL〕 , 重链包含一个可变区 〔VH〕 和3个恒定区 〔CH1, CH2, CH3〕 .单域抗体 〔single dain antibody, sd Ab〕 , 是指缺失抗体轻链， 而只有重链可变区的一类抗体， 因其分子量小， 也被称为纳米抗体 〔nanobody〕 .上世纪九十年代， 单域抗体最早在骆驼科动物中被发现， 之后在护士鲨， 大星鲨和鳐鱼等软骨鱼纲动物中也发现了类似的抗体。单域抗体虽然结构简单， 但仍然可以到达与传统抗体相当甚至更高的与特异抗原结合的亲和力。相比于传统抗体， 单域抗体具有分子量小、稳定性强、易于重组表达等优点。近年来在生物学根底研究和医学临床应用方面均备受关注并被广泛应用。本文将从单域抗体的结构特征、理化性质、筛选方法以及其在生物医学领域的重要应用进展进行综述。 　　 　　关键词：重链抗体； 单域抗体； 骆驼； 纳米抗体； 　　 　　传统抗体分子 〔Ig G〕 在结构上是由两条相同的重链和两条相同的轻链组成， 此种结构在哺乳动物中均是非常保守的。抗体分子的轻链包含了一个VL区和一个CL区 〔图1〕 , 而重链那么拥有1个VH区和3个CH区 〔CH1、CH2和CH3〕 .VH区和VL区之间通过二硫键相互连接形成抗体的可变区 〔Fv〕 , 是抗体识别抗原的最小单位， 抗体可变区的序列差异决定了抗体能够特异地识别不同的抗原。而CL区和CH区那么是相对保守的， 被称为抗体的恒定区， 其中CH区的CH2和CH3两个区域对于抗体招募免疫细胞发挥ADCC 〔抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用〕 和CDC 〔补体依赖的细胞毒性作用〕 功能有着重要的作用[1-2]. 　　 　　1993年布鲁塞尔自由大学的HamersCasterman等首先报道了骆驼血液中除了传统的Ig G抗体外还存在另一种类型的抗体， 与传统的哺乳动物抗体Ig G分子结构不同， 这种抗体既缺失传统抗体的轻链， 也缺少重链恒定区的CH1区域， 被称为重链抗体 〔Heavy chain antibody, Hc Ab〕 .重链抗体的可变区仅由抗体重链的可变区组成 〔图1〕 , 与传统抗体的Fab类似， 该可变区可以与抗原特异性的结合， 因此重链抗体可以发挥和传统抗体一样的功能。在哺乳类动物中， 目前只有在胼足亚目的骆驼科动物血液中发现含有功能性的重链抗体， 同属于偶蹄目的反刍亚目和猪形亚目动物体内未发现这类抗体[3].Hc Ab普遍存在于各种骆驼科动物中， 包括单峰驼Camelus dredarius、亚州双峰驼Camelus bactrianus、南美洲的大羊驼Lama glama、原驼Lama guanicoe、羊驼Vicugna pacos等动物中均有发现， 尽管其所占比例略有不同， 如在南美洲羊驼的血液中重链抗体比例为10%ndash;25%, 而在普通的双峰骆驼中那么高达50%ndash;80%[4-5].除了骆驼科动物外， 在护士鲨 〔又称为铰口鲨， nurse shark, Ginglymosta cirratum〕 、大星鲨 〔Smooth dogfish, Mustelus canis〕 、白斑角鲨 〔Spiny dogfish, Squalus acanthias〕 、鳐鱼 〔Skate〕 和魟鱼 〔Ray〕 等软骨鱼纲动物血液也存在类似结构的抗体。在这些远古的物种血液中除了有异源四聚体的Ig M和Ig W抗体外， 还有一种被称为新抗原受体 〔Ig new antigen receptor〕 的重链抗体， 简称为Ig NAR[6], 这类抗体由两个相同的重链组成， 重链包含5个恒定区和1个可变区 〔图1〕 . 　　 　　无论是骆驼科动物来源的Hc Ab还是软骨鱼来源的Ig NAR, 其特异性结合抗原的均为单一重链的可变区， 分别被称为VHH 〔Variable dain of heavy chain of heavy-chain antibody, VHH〕 和VNAR 〔Variable dain of new antigen receptor, VNAR〕 .采纳分子生物学技术直接克隆