靶向MRP1基因pRNAT-H1#46;1以及shuttle-RFP重组质粒表达载体构建_毕业设计论文-精品.pdfVIP

齐 齐 哈 尔 大 学 毕业设计（论文） 题 目 靶向 MRP1 基因 pRNAT-H1.1/shuttle-RFP 重组质 粒表达载体构建 学 院 专业班级 学生姓名 指导教师 成 绩 2011 年 6 月 20 日 齐齐哈尔大学毕业设计 ( 论文 ) 摘 要 癌症严重威胁着人类的健康， 其发病率呈上升趋势。 化疗作为其常规临床治疗手段， 在癌症治疗中具有手术和放射治疗不能替代的作用。肿瘤细胞的多药耐药性（ multidrug resistance, MDR）是导致肿瘤细胞化疗失败的主要原因。肿瘤细胞产生多药耐药的原因 较为复杂，多药耐药相关蛋白 1 （Multidrug Resistance-associated Protein 1，MRP1）的过 度表达是导致其产生多药耐药的主要原因之一。 RNA 干扰 (RNA interference ，RNAi) 是近年来发现的能快速、高效、特异的沉默目的基因表达的技术，如能通过 RNAi 技术 沉默 MDR1 基因，逆转肿瘤细胞的多药耐药性将为改善癌症病人的化疗效果奠定基础。 目的：本课题选用 pRNAT-H1.1/shuttle-RFP 表达穿梭载体。构建针对 mrp1 mRNA 的 RNA 干扰表达载体。 方法：将预先根据 MRP1 基因序列设计合成的编码 siRNA 的 cDNA 序列与 pRNAT-H1.1/shuttle-RFP质粒载体连接， 构建靶向 mrp1 siRNA 重组质粒。将重组质粒转 化 E.coli DH5 α后大量提取重组质粒， 经菌落 PCR 和 DNA 测序分析检测重组载体构建 结果。 结果：成功构建靶向 MRP1 基因 pRNAT-H1.1/shuttle-RFP重组质粒表达载体。为下 一步抑制 mrp1 基因在肿瘤细胞中的表达奠定基础。 关键词 ：RNA 干扰； MRP1 ；pRNAT-H1.1/shuttle-RFP质粒；穿梭载体 I 齐齐哈尔大学毕业设计 ( 论文 ) Abstract Cancer, a serious threat to human health, the incidence are on the rising trend. Chemotherapy as the routine clinical therapy of tumor, which is an irreplaceable way in cancer treatment. MDR of tumor cell cause the failure of chemotherapy treatment . The reason causing the cancer MDR is relatively complicated, and the excessively expression of multidrug resistance-associatedprotein 1(MRP1) is one of the reasons causing MDR. Silencing MDR1 gene by RNAi, we can improve the effect of chemotherapy by decrease the l