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2021年肥达试验和沉淀反应实验报告 2021年肥达试验和沉淀反应实验报告 PAGE / NUMPAGES 2021年肥达试验和沉淀反应实验报告 试验汇报 试验名称 肥达试验 试验日期 院 系 专 业 班 级 姓 名 学 号 一、 试验目 学会肥达反应原理、 方法以及结果分析。了解肥达反应在伤寒和副伤寒杆菌感染检测中应用。 二、 试验器材 试剂: 生理盐水、 患者血清、 伤寒杆菌H菌液、 伤寒杆菌O菌液、 甲型副伤寒杆菌H液、 乙型副伤寒杆菌H菌液 器材: 水浴锅、 冰箱、 小试管32支、 试管架、 记号笔、 移液枪 三、 试验原理 1.伤寒杆菌有三种抗原: 分别为菌体抗原（O抗原）、 鞭毛抗原（H抗原）、 体表抗原（Vi抗原）。其中以O抗原及H抗原抗原性较强, 而Vi抗原抗原性不强, 且对应抗体效价低且为时短暂, 随细菌消除而消失, 故不列为肥达试验检测项目。（但其检验有利于发觉伤寒带菌者。）当抗原碰到特异性抗体（抗O及抗H）时, 便会发生凝集反应, 经过对凝集物量多少来推算病人体内抗体多少, 以帮助诊疗、 诊疗及判定预后。 2.用已知伤寒沙门菌菌体（O）抗原和鞭毛（H）抗原, 以及引发副伤寒甲型副伤寒沙门菌、 乙型副伤寒沙门菌H抗原诊疗菌液与受检血清做试管或微孔板凝集试验, 测定受检血清中有没有对应抗体及其效价试验。 四、 试验过程及步骤 1. 取清洁小试管32支, 分成4排, 每排8支, 依次编号。 2.32支小试管, 用移液枪各注入0.5ml生理盐水。 3.第一管内加入1: 10稀释患者血清0.5ml, 用1ml吸管吹吸三次, 混匀, 吸出0.5ml注入第二管作对倍稀释, ……依次稀释至第7管, 弃去0.5ml, 第8管为对照。第二排、 第三排、 第四排以相同时骤加入患者血清。 4. 第一排各管内注入伤寒杆菌H菌液0.5ml; 第二排各管注入伤寒杆菌O菌液0.5ml; 第三排各加入甲型副作寒杆菌H液0.5ml; 第四排各管加入乙型副伤寒杆菌H菌液0.5ml。 5. 置于56℃水浴箱2~4小时。 6.放冰箱过夜或放37℃水浴箱18小时后观察结果。 7. 结果观察 最强:上液澄清, 细菌全部凝集沉淀于管底。 强: 上液轻度混浊, 细菌大部分凝集沉淀于管底。 弱: 上液混浊, 细菌少部分凝集。 不凝: 液体呈乳状与对照管相同。 五、 试验总结 1.结果与分析: 先观察对照管, 正确结果应无凝集现象, 再观察各试验管凝集现象, 凝集程度以“+”多少表示之。 （+++）最强, 上液澄清, 细菌全部凝集沉淀于管底。 （++）强, 上液轻度混浊, 细菌大部分凝集沉淀于管底。 （+）弱, 上液混浊, 细菌少部分凝集。 （-）不凝, 液体呈乳状与对照管相同。 效价判定: 以能出现“++”凝集现象血清最高稀释度为该血清凝集效价。 通常认为O抗体效价在1: 80以上, H抗体效价在1: 160以上, 有辅助诊疗意义。 H甲或H乙达成1: 80或以上含有诊疗意义。 但在分析结果时, 应注意以下两点: （1）非肠热症患者, 因为曾接种过伤寒, 副伤寒疫苗或以往在流行区有过隐性感染或患过伤寒, 副伤寒, 以及回想反应等原因, 也可展现阳性结果。不过, 由这些原因所引发阳性反应关键是H抗体升高, O抗体效价通常不高, 同时, 每隔5~7天试血一次, 其抗体效价通常不会随病程而升高。上述这些都有别于现症感染。 （2）少数肠热症患者, 因为发病早期曾使用大量抗生素, 或机体有免疫缺点病, 或机体反应性极弱等原因, 抗体效价能够很低, 甚至为阴性结果。 所以不能只依据肥达氏试验结果去作简单肯定或否定结论, 必需结合当地流行情况, 既往接触史, 以及临床症状和体征, 做出正确判定。 2.肥达反应诊疗标准: 肥达反应是诊疗伤寒副伤寒辅助诊疗, 其结果解释必需结合临床变现和病程, 病史, 以及地域流行病学情况。 机体患伤寒、 副伤寒, 通常于发病后1~2周内血液中出现特异性抗体而且伴随病程延长而效价渐升, 此时即可为阳性, 第4周可达峰值, 以后又逐步降低。 通常以“O”凝集效价在1/80或以上和H”在1/160或以上为阳性。 O抗体关键是IgM,出现较早; H抗体关键是IgG,出现较晚。依据此特点, 肥达试验结果有以下诊疗价值: 二者均超出正常值, 患伤寒可能性大; 二者均在正常值内, 患伤寒可能性小; H抗体效价超出正常值, O抗体效价正常, 可能是接种了伤寒菌苗或者是接种回想反应; O抗体效价超出正常值, H抗体效价正常, 可能是伤寒早期或者其她沙门氏菌感染; 通常间隔1~2周复查, 若抗体效价比前次结果增高2~4倍, 则含有诊疗价值。 六、 老师评价 试验汇报 试验名称 沉淀反应 试验日期 院 系