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薄层色谱参数介绍
一、比移值(Rf值)
在薄层色谱中,一般采用定时展开,即在同一展开时间内组分与展开剂迁移的距离。组分的移动距离(L)与展开剂移动距离(L0)之比称为比移值,为定性参数。 其测量方式如下图1所示,其计算方式如下:
L:原点至斑点中心的距离;L0:原点至溶剂前沿的距离
当Rf=0 组分留在原点;
Rf=1 组分随溶剂前沿一起移动;
Rf可用范围是0.2~0.8,最佳范围是0.3~0.5,Rf总是小于1 。
图1 Rf测量示意图
影响Rf值的因素:
(1) 待分离物的化学性质
(2) 薄层板的性质:固定相的粒度、厚度
(3) 展开剂的极性
(4) 其他条件:温湿度、饱和情况等
二、相对比移值(Rr值)
由于影响Rr值的因素很多,要在不同实验室、不同实验者间进行同一组分的Rf值比较是很困难的和不准确的,所以,常采用相对比移值(relative retardation factor,Rr)作为定性参数。是指被测组分的比移值与参照组分的比移值之比。 如下式所示:
式中Rf(i) 、Rf(s)分别为组分i和参考物质S在同一薄层板上同一展开条件下所测得比移值。
由于参考物与组分在完全相同的条件下展开,能消除系统误差,重复性和可靠性都比比移值好。在不同的实验室、不同实验者间进行的测定Rf是比较困难的,因此建议采用相对比移值Rr值。Rr可以大于1,也可以小于1。
三、相平横参数
分配系数K= Cs/Cm
容量因子 k= CsVs/CmVm
在色谱条件确定的情况下,Rf只与组分性质有关,是薄层色谱基本定性参数,说明组分的色谱保留行为,K或k大Rf小,K或k小Rf 大。
四、分离度
它是衡量薄层色谱分离效果的重要指标,是指相邻两斑点中心至原点的距离之差与两斑点平均径向宽度(径向宽度是指斑点沿着展开方向的宽度)的比值。
其计算公式如下:
L2、L1:原点至两斑点中心的距离;W1、W2:两色谱峰宽。当R>1时,相邻两斑点完全分开。
图2分离度 R测量示意图
五、计算举例
在薄层板上分离A、B两组分的混合物,当原点至溶剂前沿距离为16.0cm 时,两斑点质量重心至原点的距离分别为6.9 cm 和5.6cm,斑点直径分别为0.83cm 和0.57cm。求两组分的分离度及Rf 值。
解:
答:分离度是1.9,A、B两组分的比移值分别是0.43和0.35。
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