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大豆转基因检测
大豆转基因检测
本实验采用定性pcr方法检测大豆是否为转基因。
实验结果
1.大豆基因组提取质量检测
1.1琼脂糖电泳:
图一
吸光值检测:DNA浓度=OD260/OD280=1.85
在1.7-2.0之间,符合PCR的标准。
PCR结果:
由于第一次结果不是很好,本实验经过两次pcr结果。
第一次:
图二
L
C
M
L
C
M
第二次:
图三
实验结果分析
如图一:(1)提取出的大豆基因组成色较好。电泳条带清晰。但颜色较淡,可能是点样的体积过少。
(2)跑电泳前使用氯仿/异戊醇擦拭电泳槽面检测DNA的结果较好
图二:此为第一次跑PCR的电泳图。
图中有明亮且清晰的条带,但Maker跑的质量不是很好。
经分析可能是凝胶的质量不够好,或者是点样点的不好。
图三:为第二次PCR产物电泳,效果较好,有清晰明亮条带,能看清。
讨论:
本次实验基本达成实验目的,有些地方需要注意。
(1)提取DNA的时候要仔细,DNA的质量高低影响后续实验。比如蛋白质等物质需要除尽。
(2)使用RNArase需要注意,不然容易导致实验失败。
(3)在配制PCR体系的时候,发现配制母液再分装到各个管时,导致最后一管的体积不够,导致之后影响PCR。
(4)跑电泳前 使用氯仿异戊醇擦拭电泳槽发现结果较好。
(5)本实验使用EB染色,但个人认为可以尝试核酸染料,感觉本次实验染色不如以前使用核酸染料效果佳。
谢谢
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