样品预处理-样品冷冻干燥及结合物水解.pdfVIP

生物样品预处理 -样品冷冻干燥及结合物水解 1.1 样品冷冻干燥 冷冻干燥是一种储存和预处理生物样品的有效方法，但其针对性比较强，主 要适用于大量和被检测药物的水溶性比较强样品，此方法也适用于挥发性较强的 药物。此外还有一种情况就是有些被测药物需要衍生才能被检测到，若采用液- 液萃取则需要进行样品浓缩，在一定温度下会导致被测药物分解，此时采用冷冻 方法最为合适。 基本原理是将样品冷冻，其中的水分会形成冰壳附着在样品表面，增大了挥 发面积，再将其放入冻干机减压，冰则直接升华，其他杂质也会一并挥发掉。但 如果被测药物挥发性过强，也可能损失一部分。 冷冻干燥生物样品时可先将其置于冰-丙酮浴，液氮中或其他低温条件下。 半固体样品如粪便、组织等冷冻时间为1-10min 即可放入冻干机中。 1.2 结合物水解 药物在体内第二相代谢反应之后，常形成葡萄苷酸或硫酸脂等结合物。使一 些药物无法以游离状态存在。如果想要检测母体药物浓度就需要将其水解后再进 行测定。 1.2.1 酸水解 酸水解，通常使用无机酸，如尿样中结合物水解可加入适量的盐酸溶液。至 于加入盐酸的浓度、酸化时间及加