正式微生物的实验室培养.pptxVIP

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砧板上的微生物肠黏膜上分布的细菌微生物的实验室培养武陟一中东区高二生物组 凉州词王翰 葡萄美酒夜光杯,欲饮琵琶马上催。醉卧沙场君莫笑,古来征战几人回。 微生物基础知识 实验操作 课题延伸 微生物基础知识 微生物的定义 微生物的类群 微生物的营养 微生物培养基 无菌技术微生物的定义: 是一切肉眼看不见的或看不清的微小生物的总称。细菌球菌spherical coccus杆菌Rod-shaped bacillus螺旋菌spirallum球菌(coccus)双球菌(diplococcus)四联球菌(tetrad)链球菌Streptococcus葡萄球菌Staphylococcus杆菌(bacillus)双歧杆菌分枝杆菌螺菌螺旋菌(spiral bacterium)弧菌 细菌的菌落⑴.定义:单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。⑵.特征:大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。(课本24页)⑶.功能:每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据。几种菌落及其形态几种菌落及其形态细菌细胞的构造基本结构:细胞壁、 细胞膜、 细胞质、 拟核 (肽聚糖) (只有核糖体) (DNA所在)特殊结构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞霉菌毛霉黄曲霉青霉酵母菌蕈类 ??病毒 微生物的营养 Nutrient(营养物): 凡能够满足机体生长、繁殖和完成种种生理活动所需要的物质通常称为微生物的营养物。营养物质按照它们在机体中的生理作用不同,可以将它们区分为: 碳源、氮源、无机盐、生长因子、水水作用: ①优良的溶剂 ②可维持生物大分子结构的稳定,并参与某些重要的生物化学反应碳源⑴.概念:提供碳元素的物质。⑵.来源:①无机碳源:CO2、NaHCO3、CaCO3等②有机碳源:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等⑶.作用:①构成细胞物质和一些代谢产物②有些碳源是异养微生物的主要能源物质氮源⑴.概念:提供氮元素的物质。①无机氮源:N2、NH4+、NO3-、NH3等。⑵.来源:②有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等主要用于合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物。⑶.作用:无机盐⑴.概念:提供除碳源、氮源以外的各种重要元素。无机化合物⑵.来源:⑶.生长因子⑴.概念:微生物生长不可缺少的微量有机物。⑵.作用:酶和核酸的组成成分。⑶.常见的生长因子:维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。⑷.来源:酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等。 微生物培养基天然培养基:含用化学成分还不明确的天然物质。如牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基按化学成分不同化学成分完全了解的物质配制而成。如高氏1号培养基、查氏培养基合成培养基:半合成培养基:既有天然成分又有纯化学试剂。如马铃薯蔗糖培养基液体培养基:表面生长均匀混浊生长沉淀生长半固体培养基:固体培养基:菌落无动力有动力(弥散)根据某种微生物的特殊营养要求或其对化学、物理因素的抗性而设计的培养基。选择培养基:按功能不同鉴别培养基:培养基中加有能与某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相似的其他菌落相区分的培养基叫~。 无菌技术 无菌技术泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。灭菌方法要求适用范围接种环的灭菌灼烧灭菌干热灭菌培养皿、玻璃棒的灭菌 160-170℃ 1-2h高压蒸汽灭菌100kPa 121℃ 15-30min培养基、无菌水的灭菌 实验操作 仪器、设备 制备培养基 纯化、接种 结果分析与评价二.实验操作(以培养大肠杆菌为例)㈠.制备牛肉膏蛋白胨培养基1.计算2.称量3.溶化4.灭菌: 将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。5.倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时,在酒精灯附近倒平板。2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种。倒平板操作问题讨论1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。平板划线的操作㈡.纯化大肠杆菌微生物的接种的常用接种方法有:平板划线法和

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