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完好版本凝胶迁徙实验EMSA实验方法 完好版本凝胶迁徙实验EMSA实验方法 完好版本凝胶迁徙实验EMSA实验方法 凝胶迁徙实验（EMSA）实验方法 凝胶迁徙实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁徙率实验（ EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是一种用于蛋白与核算互相作用的技术。最先是用于转录 因子与启动子互相作用的考证性实验，也可应用与蛋白究。  -DNA、蛋白 -RNA 互作研 一、实验原理 EMSA主要鉴于蛋白 -探针复合物在在凝胶电泳过程中迁徙较慢的原理。 依据实验设计特异性和非特异性探针， 当核酸探针与样本蛋白混淆孵育时， 样本中能够与核酸探针联合的蛋白质与探针形成蛋白 -探针复合物；这类复合物因为分子量大，在进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时迁徙较慢，而没有联合蛋白的探针则较快； 孵育的样本在进行聚丙烯酰胺凝胶电泳并转膜后，蛋白 -探针复合物会在膜靠前的地点形成一条带，说明有蛋白与目标探针发送互作。二、实验操作步骤 1、实验前准备 （ 1）合理的实验方案 依据研究目的合理设计特异性探针实验组以及非特异性探针比较组， 若有必需还能够增添特异性抗体组、特异性核酸竞争组等。 （ 2）样本制备 能够选择提取样本的总蛋白、 核蛋白或许使用纯化好的目的蛋白。对样本蛋 白进行定量，实验中等量加入蛋白。 （ 3）探针制备 依据实验要求设计不一样的探针并增添