应用酶联免疫法快速检测水产品孔雀石绿残留.docVIP

龙源期刊网 应用酶联免疫法快速检测水产品孔雀石绿残留作者：曾蓉　王明力来源：《安徽农业科学》2015年第14期 ????????摘要 ????????[目的]探讨酶联免疫检测法在快速检测水产品孔雀石绿残留中的应用。[方法]应用一种酶联免疫试剂盒对市场抽取的43份水产品中残留的孔雀石绿和隐性孔雀石绿进行快速检测。[结果]水产品中孔雀石绿和隐形孔雀石绿检出率为6.98%。[结论]该快速检测法可用于大批量水产品的孔雀石绿和隐性孔雀石绿快速筛查。 ????????关键词酶联免疫法；孔雀石绿；食品安全 ????????中图分类号S851.34+7文献标识码 ????????A文章编号0517-6611（2015）14-074-02 ????????Abstract [Objective] The application of enzymelinked immunosorbent assay in rapid detecting malachite green residues in aquatic products were explored. [Method] The malachite green residues and implicit malachite green in 43 aquatic products were detected by enzymelinked immunosorbent assay rapidly. [Result] The detection rate of malachite green and stealth malachite green in aquatic products reached 6.98%. [Conclusion] The rapid detection method can be used in large quantities and implicit malachite malachite green aquatic rapid screening. ????????Key words ELISA； Malachite green； Food safety ????????孔雀石绿（MG）是一种带有金属光泽的绿色结晶体，属三苯甲烷类染料，作为杀真菌剂和消毒剂被广泛应用在水产养殖上[1]。孔雀石绿被鱼体吸收后会代谢为危害更大的隐形孔雀石绿（LMG）和隐形结晶紫（LCV），并沉积于脂肪组织，经研究发现孔雀石绿具有高毒、高残留、致畸、致癌、致突变等副作用，残留时间达到100 d以上，目前许多国家已禁用孔雀石绿。日本、美国、欧盟已不允许其作为兽药用于水产养殖上。我国在2002年在《动物性食品中兽药残留最高限量》（农业部公告235号）中将孔雀石绿列为禁用药[2]，在动物性食品中不得检出。但因其价格低廉，在水霉病防治方面尚未有很好的替代品，所以在水产养殖、运输过程中仍有违规使用，在不同程度上存在禁而不止的现象[3]。 ????????随着科学技术的发展，检测水产品中孔雀石绿、结晶紫类物质的手段和方法多种多样，检测仪器越来越灵敏。常见方法有国家标准、ELISA试剂盒和胶体金试纸3类。2006年我国颁布了国家标准GB/T20361-2006《水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》[4]，该标准方法的准确度较高，但检测步骤多，样品前处理繁琐、费时、检测成本高，使用有机溶液量大，仪器设备昂贵，不适于对大量样品进行低成本快速筛选、现场判定的需要。如何采用最快捷、最经济、最准确的检验方法，是食品安全的一项重要研究内容，就目前的发展趋势看食品安全检测方法首先要体现快速，因为食品生产者、经营者、监督者都需要准确而又及时的监控结果。鉴于此，笔者选用一种酶联免疫试剂盒分别对市场抽取43份水产品中孔雀石绿残留量进行了速测，旨在为水产品安全检测提供参考。 ????????1材料与方法 ????????1.1材料 ????????1.1.1仪器。 ????????电子天平（瑞士梅特勒公司）、离心机（上海安亭仪器厂）、微孔酶标仪（美国宝特公司）、洗板机（美国宝特公司）、旋转蒸发仪（瑞士Buchi公司）、氮气吹干装置（瑞士Buchi公司）、离心管、微量移液器（单道20～200 μl、100～1 000 μl）。 ????????1.1.2试剂。 ????????乙酸乙酯（分析纯）、冰乙酸（分析纯）、正己烷（分析纯）、孔雀石绿隐性高浓度标准品（2.5 μg/L）、孔雀石绿ELISA检测试剂盒（力德力诺生物技术有限公司）。 ????????1.2方法 ????????1.2.1样品制备与提取。 ????????水产品样品去除非食用部分，用匀浆器均质样品；称取（1.00±0.05）g匀浆样品至50 ml离心管